| 应用RNAi抑制细胞中绿色荧光蛋白的表达 |
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| 引用本文： | 谢书阳,张敬之,黄淑帧,任兆瑞,曾溢滔. 应用RNAi抑制细胞中绿色荧光蛋白的表达[J]. 中华医学遗传学杂志, 2005, 22(4): 431-434 |
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| 作者姓名： | 谢书阳 张敬之 黄淑帧 任兆瑞 曾溢滔 |
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| 作者单位： | 200040,上海交通大学医学遗传研究所 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展“973”计划项目（2004 CB518806） |
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| 摘 要： | 目的 在293T和Mel细胞中研究RNA干扰（RNA interference，RNAi）对绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，eGFP）表达的沉默作用。方法 以巢式PCR方法从人胚肾293T细胞中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子，并用于驱动RNAi片段的合成；构建能抑制eGFP特异性表达的RNAi载体（TRl）。将eGFP载体和RNAi干扰载体共转染293T和Mel两类细胞中，应用荧光显微镜观察、逆转录-PCR、荧光辅助细胞分选技术和定量逆转录-PCR方法分析上述细胞中RNAi对eGFP表达的抑制情况。结果 RNAi载体能有效地使293T和Mel细胞中红系特异的eGFP表达量均降低约50％以上。结论 本文构建的RNAi载体能有效的抑制目的基因eGFP在细胞中的表达。
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| 关 键 词： | RNAi抑制细胞 绿色荧光蛋白 基因表达 RNA干扰 荧光显微镜 |
| 收稿时间： | 2004-08-30 |
| 修稿时间： | 2004-08-30 |
Suppression of enhanced green fluorescent protein expression in cells by RNA interference |
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| XIE Shu-Yang,ZHANG Jing-Zhi,HUANG Shu-zhen,REN Zhao-Rui,ZENG Yi-Tao. Suppression of enhanced green fluorescent protein expression in cells by RNA interference[J]. Chinese journal of medical genetics, 2005, 22(4): 431-434 |
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| Authors: | XIE Shu-Yang ZHANG Jing-Zhi HUANG Shu-zhen REN Zhao-Rui ZENG Yi-Tao |
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| Affiliation: | Institute of Medical Genetics, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, 200040 PR China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference Mel cell line enhanced green fluorescent protein |
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