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| 抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用 | |
| 引用本文： | 胡卫,吴胜兰,王旷靖,张良鹏,潘兹书,汤绍辉. 抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用[J]. 中国药房, 2015, 0(22): 3059-3062 |
| 作者姓名： | 胡卫 吴胜兰 王旷靖 张良鹏 潘兹书 汤绍辉 |
| 作者单位： | 1. 武汉大学医院内科,武汉,430072 2. 暨南大学附属第一医院消化内科,广州,510632 3. 武汉大学生命科学院,武汉,430072 |
| 基金项目： | 湖北省自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的:研究抑制人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法:将重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-h AFP-hTERT-siRNA3(简称siRNA3)转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞,另设阴性对照(载体p GL3-hAFP-hTERT)组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达;酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性;流式细胞仪检测转染48h后细胞周期、细胞凋亡;Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与阴性对照组和空白对照组比较,转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱,转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低,G1期Huh-7细胞明显增加,S期Huh-7细胞明显减少;Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加,IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱,以上差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。转染siRNA3表达载体的L-02细胞上述指标均无明显变化(P>0.05)。结论:重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细胞IGF2表达及细胞增殖,其可能与下调IGF2 mRNA及蛋白表达,进而引起细胞增殖相关基因PCNA、细胞周期调控相关基因Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2及细胞凋亡调控相关基因Bcl-2蛋白表达下调有关。 |
| 关 键 词： | 重组hAFP/hTERT双启动子 RNA干扰 人胰岛素样生长因子2基因 肝癌Huh-7细胞 |
Inhibitory Effect of siRNA Expression Vector Inhibiting IGF2 Gene on the Proliferation of Hepatoma Cell Line Huh-7 |
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| HU Wei,WU Sheng-lan,WANG Kuang-jing,ZHANG Liang-peng,PAN Zi-shu,TANG Shao-hui. Inhibitory Effect of siRNA Expression Vector Inhibiting IGF2 Gene on the Proliferation of Hepatoma Cell Line Huh-7[J]. China Pharmacy, 2015, 0(22): 3059-3062 | |
| Authors: | HU Wei WU Sheng-lan WANG Kuang-jing ZHANG Liang-peng PAN Zi-shu TANG Shao-hui |
| Abstract: | |
| Keywords: | Recombinant hAFP/hTERT dual promoter RNA interference Human insulin-like growth factor 2 gene Hepatoma cell line Huh-7 |