NRAGE对肠上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨神经生长因子受体作用黑色素瘤抗原基因同源蛋白(neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog，NRAGE)是否参与肠缺血再灌注（ischemia and reperfusion,I/R）损伤的过程及其对肠上皮细胞凋亡及occludin蛋白的影响。方法制备SD大鼠小肠I/R损伤模型，取肠组织行免疫组化染色，观察NRAGE蛋白的表达变化；体外肠上皮永生化细胞株IEC-6给予缺氧及复氧后观察细胞NRAGE的表达变化；将NRAGE过表达慢病毒（Lv-NRAGE组）、NRAGE干扰表达慢病毒（sh-NRAGE组）及对照慢病毒（Lv-control组）感染IEC-6细胞，并设置不加慢病毒的对照组(NC组)，Western blot及RT-PCR观察各组细胞NRAGE蛋白及mRNA的表达变化，流式细胞术观察各组IEC-6细胞的凋亡情况，Western blot观察感染慢病毒后紧密连接蛋白occludin蛋白的表达变化。结果I/R损伤后肠黏膜上皮细胞NRAGE表达较sham组升高(P<0.01)；体外IEC-6细胞缺氧6 h后NRAGE蛋白的表达增加（P<0.01），NRAGE mRNA表达升高（P<0.01）。感染慢病毒48 h后，相比于Lv-control组，Lv-NRAGE组早期凋亡率增加（P<0.01）,occludin蛋白表达降低（P<0.01），sh-NRAGE组早期凋亡率降低（P<0.01），occludin蛋白表达增高（P<0.001）。结论 NRAGE参与了I/R损伤过程，并促进肠上皮细胞凋亡，降低occludin蛋白的表达。