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| 幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆、表达和鉴定 | |
| 引用本文： | 黄学勇,李永红,段广才,范清堂,郗园林. 幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22克隆、表达和鉴定[J]. 广西医科大学学报, 2010, 27(5) |
| 作者姓名： | 黄学勇 李永红 段广才 范清堂 郗园林 |
| 作者单位： | 1. 河南省疾病预防控制中心,郑州,450016 2. 广西壮族自治区疾病预防控制中心,南宁,530028 3. 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室,郑州,450001 |
| 基金项目： | 河南省医学创新人才基金资助项目，河南省科技厅科技攻关项目基金资助课题 |
| 摘 要： | 目的:克隆幽门螺杆菌外膜蛋白基因omp22,构建幽门螺杆菌omp22基因与麦芽糖结合蛋白基因融合表达载体,并进行诱导表达,鉴定融合蛋白免疫原性,为幽门螺杆菌疫苗研究提供依据.方法:利用 PCR 技术从Helicobacter pylori郑州分离株MEL-Hp27染色体DNA上扩增omp22基因,并将其克隆到表达载体pMAL-c2X中,转化大肠杆菌(E.coli TB1),用IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,Western blot鉴定其免疫原性.结果:PCR方法扩增的omp22基因长度约为540 bp.经酶切鉴定,插入到表达载体的基因片段与预期目的DNA片段相一致;SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为22 ku,融合蛋白的表达量约占全菌总蛋白的26%.结论:成功克隆并构建了omp22基因高效原核表达系统,为幽门螺杆菌基因工程组分疫苗的研究奠定基础. |
| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 外膜蛋白基因 克隆 融合表达载体 酶切鉴定 HELICOBACTER PYLORI MEMBRANE PROTEIN omp22基因 麦芽糖结合蛋白基因 融合蛋白 蛋白免疫原性 表达产物 SDS-PAGE 转化大肠杆菌 原核表达系统 方法 组分疫苗 诱导表达 疫苗研究 扩增 |
CLONING, EXPRESSION AND IDENTIFICATION OF OUT MEMBRANE PROTEIN omp22 GENE OF HELICOBACTER PYLORI |
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