| 白纹伊蚊T7噬茵体展示cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 冀霞,赵瑞君,刘美德,赵彤言.白纹伊蚊T7噬茵体展示cDNA文库的构建[J].寄生虫与医学昆虫学报,2012,19(2):78-83. |
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| 作者姓名： | 冀霞 赵瑞君 刘美德 赵彤言 |
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| 作者单位： | 1. 山西医科大学病原生物学教研室,太原,030001
2. 军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金委青年科学基金 |
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| 摘 要： | 为筛选白纹伊蚊与相关蚊媒病毒相互作用的基因，本文构建了白纹伊蚊Aedes albopictusT7噬菌体展示eDNA文库，分离与纯化白纹伊蚊mRNA，所得mRNA经反转录合成双链cDNA后，在双链cDNA末端加上定向EcoRI／HindIn接头使其两端分别带EcoRI和Hind11I黏性末端；接着用MiniColumn纯化收集300bp以上的双链cDNA片段连接于T7 Select 10—3b载体；经体外包装后，以BLT5403为受体菌构建1v7噬菌体展示cDNA文库。所建文库的库容量经测定为1．7×10’pfu／mL，扩增后文库滴度为2．5×10^（15）pfu／mL。对从原始文库中随机挑取的50个噬菌斑进行PCR鉴定，重组率为95％以上；阳性克隆片段长度分布在200～2000bp，其中有90％的插入片段大于300bp。本文所构建的白纹伊蚊T7噬菌体展示cDNA文库，满足cDNA文库的基本要求，可以用于筛选白纹伊蚊与相关蚊病毒相互作用的基因。
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| 关 键 词： | 白纹伊蚊 蚊媒病毒 T7噬菌体 eDNA展示文库 |
CONSTRUCTION OF T7 PHAGE DISPLAY CDNA LIBRARY FROM AEDES ALBOPICTUS |
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| JI Xia
,
ZHAO Rui-Jun
,
LIU Mei-De
,
ZHAO Tong-Yan.CONSTRUCTION OF T7 PHAGE DISPLAY CDNA LIBRARY FROM AEDES ALBOPICTUS[J].Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica,2012,19(2):78-83. |
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| Authors: | JI Xia ZHAO Rui-Jun LIU Mei-De ZHAO Tong-Yan |
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| Institution: | 1. Department of Parasitology, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China ; 2. Beijing Institution of Microbiology and Epidemiology, State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Beijing 100071, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aedes albopictus Mosquito-born virus T7 phage display cDNA library |
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