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人PCK1基因克隆及其表达载体的构建
引用本文:董艳,张宏利,冯绮文,陈雪茹,苏青.人PCK1基因克隆及其表达载体的构建[J].上海交通大学学报(医学版),2006,26(2):135-137.
作者姓名:董艳  张宏利  冯绮文  陈雪茹  苏青
作者单位:上海交通大学医学院新华医院内分泌科,上海交通大学医学院瑞金医院内分泌代谢病科上海市内分泌代谢病临床医学中心上海市内分泌代谢病研究所,上海交通大学医学院新华医院内分泌科,上海交通大学医学院新华医院内分泌科,上海交通大学医学院新华医院内分泌科 上海200092,上海200092,上海200092,上海200092
基金项目:国家自然科学基金(3047818)资助项目
摘    要:目的构建人PCK1基因的真核表达载体。方法以人内脏脂肪细胞cDNA为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增PCK1基因编码区的全部序列,克隆入pGEM-T载体中,经限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1( )中,并进行双酶切鉴定。结果PCR扩增的特异性片段长度为1 972 bp,以此构建的pGEM-T-PCK1克隆载体,经限制性内切酶酶切证实载体中带有PCK1基因的目的片段,与GenBank中的人PCK1基因cDNA序列一致。重组质粒pcDNA3.1-PCK1经KpnⅠ/XbaⅠ双酶切后显示5.1 kb和2 000 bp左右的2个条带,证明PCK1基因已成功克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3.1( )中。结论成功构建了野生型pcDNA3.1-PCK1重组真核表达载体。

关 键 词:PCK1基因  克隆  真核表达载体
文章编号:0258-5898(2006)02-0135-03
收稿时间:2005-05-09
修稿时间:2005年5月9日

Cloning of Human PCK1 Gene and Construction of Its Expression Vector
DONG Yan,ZHANG Hong-li,FENG Qi-wen,CHEN Xue-ru,SU Qing.Cloning of Human PCK1 Gene and Construction of Its Expression Vector[J].Journal of Shanghai Jiaotong University:Medical Science,2006,26(2):135-137.
Authors:DONG Yan  ZHANG Hong-li  FENG Qi-wen  CHEN Xue-ru  SU Qing
Institution:1Department of Endocrinology, Xinhua Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University, Shanghai 200092, China; 2Shanghai Institute of Endocrinology and Metabolism, Shanghai Clinical Center for Endocrine and Metabolic Diseases, Ruifin Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiaotong University
Abstract:
Keywords:PCK1 gene  clone  eukaryon expression vector
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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