| 人源性大肠癌抗原基因噬菌体表达文库的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 刘宇虎,张振书,钟东,武金宝,但汉雷,杨兴龙,杨晓强,陈学清,赖卓胜,肖冰.人源性大肠癌抗原基因噬菌体表达文库的构建及鉴定[J].南方医科大学学报,2003,23(6):538-541，545. |
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| 作者姓名： | 刘宇虎 张振书 钟东 武金宝 但汉雷 杨兴龙 杨晓强 陈学清 赖卓胜 肖冰 |
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| 作者单位： | 第一军医大学南方医院全军消化内科研究所,广东,广州,510515 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30171053)S~~ |
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| 摘 要： | 目的构建人源性大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库。方法从人大肠癌组织中提取总RNA,用RT-PCR合成cDNA第1链,用LD-PCR合成cDNA第2链,除去小于500 bp的小片段,与去磷酸化的λTriplEx2噬菌体左、右臂连接,体外包装,构建成cDNA噬菌体表达文库。转化E.coliXL1-Blue感受态细胞,滴定文库的滴度,确定文库容量大小;用ITPG诱导和X-gal显色测定重组率;用SfiⅠ酶切鉴定插入的cDNA片段大小。结果构建成含2.39×106 pfu/ml重组噬菌体的人大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库,重组率为97.5%,插入cDNA片段大小范围从600~4 000 bp,平均长约1 400 bp。结论成功构建高质量人源性大肠癌抗原基因cDNA噬菌体表达文库,适合于大批量筛选cDNA克隆的大肠癌相关抗原基因。
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| 关 键 词： | 结肠直肠肿瘤 噬菌体 抗体 细菌 抗原基因 cDNA文库 |
| 文章编号： | 1000-2588(2003)06-0538-04 |
| 修稿时间： | 2003年1月22日 |
Construction and identification of the cDNA phage expression library for human colorectal cancer antigens |
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| LIU Yu-hu,ZHANG Zhen-shu,ZHONG Dong,WU Jin-bao,DAN Han-lei,YANG Xing-long,YANG Xiao-qiang,CHEN Xue-qing,LAI Zhuo-sheng,XIAO Bing Institute for Digestive Diseases of PLA,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou ,China.Construction and identification of the cDNA phage expression library for human colorectal cancer antigens[J].Journal of Southern Medical University,2003,23(6):538-541，545. |
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| Authors: | LIU Yu-hu ZHANG Zhen-shu ZHONG Dong WU Jin-bao DAN Han-lei YANG Xing-long YANG Xiao-qiang CHEN Xue-qing LAI Zhuo-sheng XIAO Bing Institute for Digestive Diseases of PLA Nanfang Hospital First Military Medical University Guangzhou China |
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| Institution: | LIU Yu-hu,ZHANG Zhen-shu,ZHONG Dong,WU Jin-bao,DAN Han-lei,YANG Xing-long,YANG Xiao-qiang,CHEN Xue-qing,LAI Zhuo-sheng,XIAO Bing Institute for Digestive Diseases of PLA,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510515,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | colorectal neoplasms bacteriophages antibodies bacterial antigens gene cDNA library |
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