| 血管内皮细胞生长因子基因体外转染小鼠NIH3T3细胞的生物活性 |
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| 引用本文： | 郑岩,易成刚,丁坦,郭树忠,胡学煜,周志强,潘华,刘丹.血管内皮细胞生长因子基因体外转染小鼠NIH3T3细胞的生物活性[J].中国组织工程研究与临床康复,2006,10(33):65-67. |
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| 作者姓名： | 郑岩 易成刚 丁坦 郭树忠 胡学煜 周志强 潘华 刘丹 |
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| 作者单位： | 1. 解放军第四军医大学西京医院,全军整形外科研究所,陕西省西安市,710032
2. 解放军第四军医大学西京医院,骨科,陕西省西安市,710032 |
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| 摘 要： | 目的:用基因工程方法改造成纤维细胞,使其分泌血管内皮细胞生长因子,观察成纤维细胞作为基因转染的靶细胞的可行性。方法:实验于2005-11在解放军第四军医大学西京医院全军整形外科研究所完成。PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒的扩增、提取、纯化和鉴定后,将培养14d细胞融合约80%的小鼠NIH3T3细胞在24孔板中进行转染,细胞随机分为3组,每组10孔,分别为PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染组、空质粒转染组和不转染质粒组。采用免疫组织化学化学检测血管内皮细胞生长因子表达。ELISA方法检测血管内皮细胞生长因子外分泌。四甲基偶氮唑盐法检测小鼠NIH3T3细胞对PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染的敏感性。结果:①PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒的基因测序结果显示序列正确。②免疫组织化学染色显示:小鼠NIH3T3细胞转染4d后胞浆内可观察到阳性表达产物,对照组呈阴性结果。③ELISA检测结果:小鼠NIH3T3细胞转染14d后,PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染组、空质粒转染组和不转染质粒组3组培养上清中血管内皮细胞生长因子浓度分别346±23,0,0ng/L(P<0.05)。④四甲基偶氮唑盐法检测结果:PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染组、空质粒转染组和不转染质粒组所测的490nm的A值比较差异均无显著性(依次为0.96±0.11,0.91±0.10,0.98±0.16,P>0.05)。PcDNA3.1(-)/VEGF165质粒转染对小鼠NIH3T3细胞增殖无影响。结论:小鼠NIH3T3细胞可作为血管内皮细胞生长因子基因转染的靶细胞,用于基因治疗。
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子类 基因疗法 新生血管化 生理性 |
| 文章编号： | 1671-5926(2006)33-0065-03 |
| 修稿时间： | 2006年6月24日 |
Biological activity of mouse NIH3T3 cells following in vitro transfection of vascular endothelial cell growth factor gene |
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| Zheng Yan,Yi Cheng-gang,Ding Tan,Guo Shu-zhong,Hu Xue-yu,Zhou Zhi-qiang,Pan Hua,Liu Dan.Biological activity of mouse NIH3T3 cells following in vitro transfection of vascular endothelial cell growth factor gene[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2006,10(33):65-67. |
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| Authors: | Zheng Yan Yi Cheng-gang Ding Tan Guo Shu-zhong Hu Xue-yu Zhou Zhi-qiang Pan Hua Liu Dan |
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