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真核表达人和鼠可溶性VEGFR 2的双基因疫苗的构建及抗肿瘤实验研究
引用本文:金璐,赵玉伟,李知勉,赵成建,王晓飞,张凌,杨寒朔. 真核表达人和鼠可溶性VEGFR 2的双基因疫苗的构建及抗肿瘤实验研究[J]. 四川大学学报(医学版), 2010, 41(4)
作者姓名:金璐  赵玉伟  李知勉  赵成建  王晓飞  张凌  杨寒朔
作者单位:四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041;四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,成都,610041
摘    要:目的 构建能同时表达人和鼠可溶性VEGFR2的双基因真核表达载体.并初步验证其功能.方法 分别以pORF-hVEGFR2和pORF-mVEGFR2为模板,通过PCR将人和鼠的sVEGFR2基因定向克隆人真核细胞双顺反子载体pVITR02的多克隆位点区.构建pVITRO2-hm-sVEGFR2双基因表达质粒.通过体外实验研究pVITRO2-hm-sVEGFR2的表达产物能否阻断VEGF对脐静脉血管内皮细胞的促增殖能力,体内实验建立小鼠B16肿瘤模型研究其抗肿瘤活性,CD31免疫组化染色检测其对肿瘤新生血管的抑制情况.结果 pVITR02一hm-sVEGFR2双基因表达质粒成功构建,体外能阻断VEGF对血管内皮细胞的促增殖能力,能明显抑制肿瘤在小鼠体内的生长以及肿瘤组织内的新生血管生成,其抑制作用大于人或鼠可溶性VEGFR2单基因治疗方案.结论 pVITRO2-hm-sVEGFR2明显抑制新生血管生成活性,是一种新型的抗血管生成DNA疫苗,为抗肿瘤治疗研究提供了新的思路和方法.

关 键 词:VEGF  VEGFR2  DNA疫苗  血管生成

Anti-tumor Effects Induced by the DNA Vaccine Coding Human and Mouse Soluble VEGFR2
JIN Lu,ZHAO Yu-wei,LI Zhi-mian,ZHAO Cheng-jian,WANG Xiao-fei,ZHANG Ling,YANG Han-shuo. Anti-tumor Effects Induced by the DNA Vaccine Coding Human and Mouse Soluble VEGFR2[J]. Journal of Sichuan University. Medical science edition, 2010, 41(4)
Authors:JIN Lu  ZHAO Yu-wei  LI Zhi-mian  ZHAO Cheng-jian  WANG Xiao-fei  ZHANG Ling  YANG Han-shuo
Affiliation:JIN Lu,ZHAO Yu-wei,LI Zhi-mian,ZHAO Cheng-jian,WANG Xiao-fei,ZHANG Ling,YANG Han-shuo.State Key Laboratory of Biotherapy,West China Hospital,Sichuan University,Chengdu 610041,China
Abstract:Objective To develop a novel anti-angiogenesis strategy based on a DNA vaccine coding both human and mouse soluble VEGFR2.Methods The gene fragments coding human and mouse sVEGFR2 were amplified with PCR and cloned into pVITRO2 to generate pVITRO2-hm-sVEGFR2 recombinant.The in vitro VEGF blocking effect of the pVITRO2-hm-sVEGFR2 expression products on HUVEC cells were evaluated.The anti-tumor effect of pVITRO2-hm-sVEGFR2 was studied in mouse B16 model.The microvessels were stained by using CD31 antibody.Res...
Keywords:VEGF  VEGFR2
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