黄芪多糖定向诱生脐血来源树突状细胞及其对T细胞增殖作用的研究

目的：观察黄芪多糖（Astragalus polysaccharides，APS）体外对脐血单核细胞定向分化为树突状细胞（DCs）及其对T细胞的刺激增殖作用。方法：无菌条件下采集脐血，密度梯度离心法获得脐血单个核细胞分为3组，实验组：在含有APS（浓度为100mg/L）的RPMI1640完全培养液中培养；阴性对照组：在无药物的RPMI1640完全培养液中培养；阳性对照组：在含有细胞因子（IL-4、GM-CSF、TNF-α）的RPMI1640完全培养液中培养；培养过程中用倒置光学显微镜和扫描电镜观察细胞形态；收集部分培养第12天的细胞利用流式细胞仪检测各组细胞表面CD1a、CD80、CD83和CD86的表达；收集实验组培养第12天的细胞（DCs），作为刺激细胞；分离制备健康志愿者异基因外周血单核细胞（MNC），作为反应细胞混合培养，MTT比色法检测DCs对同种异体T细胞的刺激增殖作用。结果：在培养的第72小时后实验组和阳性对照组细胞形态开始变化，随着培养时间的延长，树突状结构更加明显，第12天细胞呈典型的树突状细胞形态；阴性对照组细胞生长缓慢，培养至第12天细胞呈梭形巨噬细胞形态。培养至10天的实验组细胞扫描电镜下呈典型的树突状细胞形态。培养12天实验组、阳性对照组细胞分别高表达DCs特异性抗原CD1a、CD80、CD83和CD86，与阴性对照组对应比较差异均有显著性（P〈0.01）；实验组与阳性对照组之间比较无统计学意义（P〉0.05）。混合淋巴细胞反应显示经黄芪多糖诱生的DCs对同种异体T淋巴细胞具有明显刺激增殖作用。结论：黄芪多糖及细胞因子体外均可诱导脐血单核细胞（DCs前体细胞）定向分化为功能性（成熟）DCs；黄芪多糖诱生的DCs具有明显刺激同种异体T淋巴细胞增殖的能力，且随DCs细胞数量的增加而作用增强。

Astragalus polysaccharides (APS) induces the cord blood monocytes into mature dendritic cells (DCs) directly and its impact on T cells proliferation