通心络对大鼠胚胎神经干细胞源性神经细胞谱系的影响*★

目的：前期体内动物模型实验说明，通心络可能具有影响神经干细胞增殖及向各种神经细胞分化的作用。实验拟观察通心络对大鼠胚胎神经干细胞源性神经细胞谱系的影响以及时效、量效的关系。方法：实验于2007-06/10在南方医科大学机能学实验室完成。①实验材料：孕12~14 d SD大鼠由南方医科大学实验动物中心提供，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。通心络，主要成分为人参、水蛭、全蝎、土鳖虫、蜈蚣、蝉蜕、赤芍、冰片等，由石家庄以岭药业股份有限公司生产，国药准字Z19980015。通心络含药血清的制备：按大剂量组1 g/（d?kg）、小剂量组0.5 g/（d?kg）分别予大鼠通心络混悬液灌胃，7 d后抽血离心，吸取血清，过滤消毒，分装，-70 ℃冻存备用。②实验方法：自孕12~14 d大鼠胚胎中分离培养神经干细胞，取第3代细胞分别给予大、小剂量组通心络含药血清干预。以添加普通血清干预的为对照。③实验评估：于培养1，3，7 d通过免疫荧光染色观察各种类型神经细胞所占比例。结果：①神经干细胞经通心络含药血清干预后1 d，仅在大剂量组海马齿状回有极少数细胞呈BrdU(+)GFAP(+)，其余细胞都呈BrdU(+)Nestin(+)，小剂量组和对照组均为BrdU(+)Nestin(+)细胞。②经通心络含药血清干预后3d，大剂量组、小剂量组和对照组Nestin(+)、βtubulin(+)、GFAP(+)细胞比例差异有显著性意义（P < 0.01），GalC(+)细胞比例差异无统计学意义（P > 0.05）。③大鼠胚胎神经干细胞经通心络含药血清干预后：各组Nestin(+)细胞比例先降后升；βtubulin(+)细胞比例大剂量组持续上升，小剂量组和对照组先升后降；GFAP(+)细胞比例大剂量组先升后降，小剂量组和对照组持续上升，GalC(+)细胞比例大、小剂量组均较平稳，对照组7 d时明显上升。结论：通心络有促进大鼠胚胎神经干细胞增殖及向神经元分化的效应，并存在时效、量效关系，剂量越大效应越明显及持久。

Effect of Tongxinluo on neurocyte lineage derived from rat embryonic neural stem cells