| 一种新型抗体导向核酸转移系统关键组分的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 刘晓芬,刘云,张萃,吴强,肖笑荣,刘晓波. 一种新型抗体导向核酸转移系统关键组分的制备及鉴定[J]. 广东药学院学报, 2015, 31(3) |
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| 作者姓名： | 刘晓芬 刘云 张萃 吴强 肖笑荣 刘晓波 |
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| 作者单位： | 1. 广东药学院基础学院,广东广州,510006
2. 川北医学院基础医学院,四川南充,637000 |
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| 基金项目： | 教育部留学回国人员启动基金，四川省教育厅自然科学重点项目，广东省自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 目的 制备并鉴定葡萄球菌A蛋白-多聚赖氨酸交联物(SPA-PLL交联物),以此交联物为“接头”,构建一种新型的抗体导向核酸转移系统.方法 采用SPDP化学偶联法制备SPA-PLL交联物;采用SDS-PAGE电泳法测定SPA-PLL交联物的纯度;采用酶联法或DNA凝胶阻滞实验分别测定SPA-PLL交联物与IgG或DNA片段的结合;将SPA-PLL交联物与Tfr抗体和pEGFP-C1质粒以适宜的质量比混合即可组装成Tfr抗体导向pEGFP-C1质粒转移系统;将该抗体导向的pEGFP-C1质粒转染人肝癌HepG2细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达.结果 SPA-PLL交联物纯度较高,能良好地结合多种IgG抗体,同时也能较好地结合pEGFP-C1质粒、中和其负电荷;Tfr抗体导向pEGFP-C1质粒转移系统能特异性地转染HepG2细胞,并使pEGFP-C1质粒在细胞中有效表达.结论 SPA-PLL交联物能与核酸片段和IgG抗体非共价结合,并具有良好通用性;以此制备抗体导向核酸转移系统的过程简单方便.
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| 关 键 词： | 葡萄球菌A蛋白(SPA) 多聚赖氨酸(PLL) IgG 核酸 基因转染 |
Preparation of SPA-PLL conjugate as a key component for construction of a novel antibody-targeted non-virus gene delivery system |
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| LIU Xiaofen,LIU Yun,ZHANG Cui,WU Qiang,XIAO Xiaorong,LIU Xiaobo. Preparation of SPA-PLL conjugate as a key component for construction of a novel antibody-targeted non-virus gene delivery system[J]. Academic Journal of Guangdong College of Pharmacy, 2015, 31(3) |
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| Authors: | LIU Xiaofen LIU Yun ZHANG Cui WU Qiang XIAO Xiaorong LIU Xiaobo |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | staphylococal protein A (SPA) poly-left-lysine (PLL) IgG DNA gene transfection |
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