| 人乳头瘤病毒6bL1双顺反子载体的构建及其在哺乳动物细胞内的表达 |
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| 引用本文： | 邓列华,殷董,胡云峰,田静,计雄飞,范洪涛,郭秀枝,林泽,赵永铿. 人乳头瘤病毒6bL1双顺反子载体的构建及其在哺乳动物细胞内的表达[J]. 中华皮肤科杂志, 2011, 44(5): 347-349. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2011.05.018 |
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| 作者姓名： | 邓列华 殷董 胡云峰 田静 计雄飞 范洪涛 郭秀枝 林泽 赵永铿 |
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| 作者单位： | 1. 广州市暨南大学附属第一医院皮肤科2. 陕西省人民医院皮肤科3. 广州市天河区慢性病防治中心皮肤性病科4. 福建医科大学附属第一医院5. Medical department of johnson，Radnor PA USA6. 广州暨南大学附属第一医院皮肤科7. 广州暨南大学医学院附院皮肤科8. |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金，暨南大学自然科学基金团队项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒6b型晚期基因（HPV6b L1）的双顺反子表达载体，并使其在哺乳动物细胞内表达，以期建立含有HPV6b L1的细胞模型。方法 表达质粒pEGFP-HPV6bL1经双酶切纯化后与经过相同双酶切的真核表达质粒pIRES2-EGFP连接，酶切鉴定，挑选阳性克隆进行测序。重组质粒pIRES2-HPV6bL1-EGFP转染进小鼠成纤维细胞（NIH3T3），荧光显微镜下观察EGFP蛋白的表达，RT-PCR检测HPV6b L1 mRNA的生成。结果 成功构建含HPV6b L1的重组质粒pIRES2-HPV6bL1-EGFP。重组体成功转染进NIH3T3细胞，并用G418筛选。同时荧光倒置显微镜下可观察到细胞内有绿色荧光蛋白的表达。进一步进行RT-PCR，检测到HPV6b L1 mRNA的生成。结论 成功构建携带HPV6b L1的重组体pIRES2-HPV6bL1-EGFP并转染入NIH3T3细胞。经荧光倒置显微镜观察及RT-PCR方法检测证明HPV6b L1在NIH3T3细胞内成功表达。
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| 关 键 词： | 基因表达 |
| 收稿时间： | 2010-06-21 |
Construction of a bicistronic expression vector containing human papillomavirus (HPV) type 6b L1 gene and its expression in mammalian cells |
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| DENG Lie-hua,YIN Dong,HU Yun-feng,TIAN Jing,JI Xiong-fei,FAN Hong-tao,GUO Xiu-zhi,LIN Ze,ZHAO Yong-keng. Construction of a bicistronic expression vector containing human papillomavirus (HPV) type 6b L1 gene and its expression in mammalian cells[J]. Chinese Journal of Dermatology, 2011, 44(5): 347-349. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2011.05.018 |
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| Authors: | DENG Lie-hua YIN Dong HU Yun-feng TIAN Jing JI Xiong-fei FAN Hong-tao GUO Xiu-zhi LIN Ze ZHAO Yong-keng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene expression |
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