| BPIm23重组抗菌蛋白在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 靖学芳,安云庆,杨贵贞.BPIm23重组抗菌蛋白在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达[J].中国免疫学杂志,2004,20(6):374-378. |
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| 作者姓名： | 靖学芳 安云庆 杨贵贞 |
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| 作者单位： | 1. 首都医科大学免疫系,北京,100054
2. 吉林大学基础医学院免疫系,长春,130021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目资助 (编号 3 95 70 666) |
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| 摘 要： | 目的：采用巴斯德毕赤酵母表达系统表达分泌型功能性rBPIm23抗菌蛋白。方法：利用构建的pUC18-synBPI414质粒和PBV220-BPIm120质粒，按分子克隆方法构建pPICZa-synBPIm600重组表达载体；用线性化pVICZa-synBPIm600质粒电转化Pichia pastoris GS115，筛选抗性转化子，进行PCR和Mut表型鉴定；用甲醇诱导目的蛋白rBPIm23的表达；用离子交换层析纯化rBPIm23，并进行SDS-PAGE分析、Western blot鉴定和用BCA法定量。结果：①成功构建了pPICZa-synBPIm600重组表达载体；②获得稳定整合目的基因的GS115菌株；③表达产物相对分子量约为23kD，可与抗BPI抗体特异性结合；④培养上清液中目的蛋白表达量约为2.9mg／L。结论：BPIm23重组抗菌蛋白在毕赤酵母GS115中得到分泌表达。
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| 关 键 词： | 杀菌／渗透增强蛋白 BPIm23重组抗菌蛋白 巴斯德毕赤酵母 分泌表达 |
| 文章编号： | 1000-484X(2004)06-0374-05 |
Secretory expression of BPIm23 recombinant bactericidal protein in Pichia pastoris |
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| JING Xue Fang,AN Yun Qing,YANG Gui Zhen.Secretory expression of BPIm23 recombinant bactericidal protein in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Immunology,2004,20(6):374-378. |
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| Authors: | JING Xue Fang AN Yun Qing YANG Gui Zhen |
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| Institution: | JING Xue Fang,AN Yun Qing,YANG Gui Zhen .Department of Immunology,Capital University of Medical Sciences,Beijing 100054,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bactericidal/ permeability increasing protein (BPI) BPI m23 recombinant bactericidal protein Secretory expression |
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