| 登革2型病毒全长cDNA克隆定点诱变的OL-PCR方法 |
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| 引用本文： | 赵卫,胡志君,杨佩英,秦鄂德,于曼,陈水平,王鹏程,耿丽卿,范宝昌. 登革2型病毒全长cDNA克隆定点诱变的OL-PCR方法[J]. 中华微生物学和免疫学杂志, 2001, 21(6): 662-665 |
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| 作者姓名： | 赵卫 胡志君 杨佩英 秦鄂德 于曼 陈水平 王鹏程 耿丽卿 范宝昌 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院微生物流行病研究所病毒学专业实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30000144);军事医学科学院创新基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 对带有登革2型病毒（DEN-2）全长cDNA的质粒pDVWS501上E62、E203位点进行定点诱变。方法 设计4对点诱变引物，运用OL-PCR（overlapPCR)法，扩增出分别在E62或E203位带有点突变的2条DNA片段，克隆至T载体，获T-TB62、T-TB203两个克隆，将T-TB62用ClaⅠ和SphⅠ分别酶切，T-TB203用SphⅠ NheⅠ酶切后，用T4连接酶分别连接至pDVWS501，获重组质粒TB62和TB203。对TB62和TB203进行序列测定。结果 成功得到分别在E62、E203位带有点突变的TB62、TB203克隆。结论 OL-PCR法是具有较高突变效率的定点诱变方法。
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| 关 键 词： | 登革2型病毒 cDNA克隆 定点诱变 OL－PCR 登革热病毒 |
| 修稿时间： | 2000-08-10 |
OL-PCR for site-directed mutagenesis of full-length cDNA clone of DEN-2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dengue 2 virus cDNA clone Site directed mutagenesis OL PCR |
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