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古核嗜热菌组蛋白基因多点突变的新方法
引用本文:翁梁,纪昕,王智,刘丹,马吉胜,李娜,曹淑桂,冯雁.古核嗜热菌组蛋白基因多点突变的新方法[J].药物生物技术,2002,9(5):264-266.
作者姓名:翁梁  纪昕  王智  刘丹  马吉胜  李娜  曹淑桂  冯雁
作者单位:1. 吉林大学分子酶学工程实验室,长春,130023
2. 吉林大学免疫研究室,长春,130023
摘    要:嗜热菌组蛋白基因序列中精氨酸密码子在大肠杆菌中的表达率极低,限制了组蛋白的大量获得。运用分子生物学技术,在传统PCR定点突变技术的基础上进行改进,参照古核嗜热菌组蛋白基因序列和大肠杆菌偏爱密码子表,设计了一对含有5个精氨酸突变密码子的单链DNA,全长为115nt,在3‘端有20nt互补序列。将单链DNA在94℃,45℃复性,使其互补结合,72℃进行延伸反应,得到含有突变位点的组蛋白基因;再以此基因为模板设计相应的一对引物进行PCR扩增反应,得到大量组蛋白突变基因。该研究为一些序列已知,片段较小基因的多态突变提供了一种简单、易行的方法。

关 键 词:古核嗜热菌组蛋白  基因多点突变  聚合链式反应
文章编号:1005-8915(2002)-05-0264-03

A New Method for Multipoint Mutation of the Histone in Archaic Ther mophilic Bacterium
Abstract:
Keywords:
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