古核嗜热菌组蛋白基因多点突变的新方法 |
| |
引用本文: | 翁梁,纪昕,王智,刘丹,马吉胜,李娜,曹淑桂,冯雁.古核嗜热菌组蛋白基因多点突变的新方法[J].药物生物技术,2002,9(5):264-266. |
| |
作者姓名: | 翁梁 纪昕 王智 刘丹 马吉胜 李娜 曹淑桂 冯雁 |
| |
作者单位: | 1. 吉林大学分子酶学工程实验室,长春,130023 2. 吉林大学免疫研究室,长春,130023 |
| |
摘 要: | 嗜热菌组蛋白基因序列中精氨酸密码子在大肠杆菌中的表达率极低,限制了组蛋白的大量获得。运用分子生物学技术,在传统PCR定点突变技术的基础上进行改进,参照古核嗜热菌组蛋白基因序列和大肠杆菌偏爱密码子表,设计了一对含有5个精氨酸突变密码子的单链DNA,全长为115nt,在3‘端有20nt互补序列。将单链DNA在94℃,45℃复性,使其互补结合,72℃进行延伸反应,得到含有突变位点的组蛋白基因;再以此基因为模板设计相应的一对引物进行PCR扩增反应,得到大量组蛋白突变基因。该研究为一些序列已知,片段较小基因的多态突变提供了一种简单、易行的方法。
|
关 键 词: | 古核嗜热菌组蛋白 基因多点突变 聚合链式反应 |
文章编号: | 1005-8915(2002)-05-0264-03 |
A New Method for Multipoint Mutation of the Histone in Archaic Ther mophilic Bacterium |
| |
Abstract: | |
| |
Keywords: | |
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录! |
|