| 逆转录病毒载体介导的RNAi抑制乳腺癌细胞BSP基因表达 |
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| 引用本文： | 杨自飞,王捷,张宏斌,夏冰,冼江,王江涛,燕慧.逆转录病毒载体介导的RNAi抑制乳腺癌细胞BSP基因表达[J].医学分子生物学杂志,2009,6(5). |
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| 作者姓名： | 杨自飞 王捷 张宏斌 夏冰 冼江 王江涛 燕慧 |
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| 作者单位： | 广州军区广州总医院医学实验科,广州市,510010 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金重点项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建抑制人BSP基因表达的RNA干扰逆转录病毒载体,筛选建立稳定抑制BSP表达的MDA-MB-231BO细胞系.方法 构建靶向人BSP基因的逆转录病毒重组质粒pSilencer-BSP27、pSilencer-BSP81和pSilencer-BSP100.将其包装成病毒后感染MDA-MB-231BO细胞.用RT-PCR和Western印迹检测成功感染细胞(231BO-BSP27、231BO-BSP81、231BO-BSP100细胞)BSP基因的抑制效果.结果 双酶切和测序结果显示重组核酸片段序列与设计的序列完全相同.RT-PCR和Western印迹结果显示231BO-BSP27、BO-BSP81和231BO-BSP100细胞BSP基因在mRNA水平和蛋白水平抑制效率分别为:70.8 %、79.4 %和30.1 %;69.3 %,75.2 %和27.8 %.结论 成功构建抑制人BSP基因表达的RNAi逆转录病毒载体pSilencer-BSP27、pSilencer-BSP81和pSilencer-BSP100.获得高效稳定抑制BSP表达的231BO-BSP27、231BO-BSP81细胞系.
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| 关 键 词： | 乳腺癌 骨唾液酸蛋白 逆转录病毒 RNA干扰 基因表达与调控 |
Inhibition of BSP Gene Expression in Breast Cancer Cells by Retrovirally Mediated RNAi |
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| YANG Zifei,WANG Jie,ZHANG Hongbin,XIA Bing,XIAN Jiang,WANG Jiangtao,YAN Hui.Inhibition of BSP Gene Expression in Breast Cancer Cells by Retrovirally Mediated RNAi[J].Journal of Medical Molecular Biology,2009,6(5). |
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| Authors: | YANG Zifei WANG Jie ZHANG Hongbin XIA Bing XIAN Jiang WANG Jiangtao YAN Hui |
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