用EBV转化的大肠癌患者B细胞构建噬菌体抗体库 |
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引用本文: | 朱建高,李跃辉,胡锦跃,李官成,周国华,李小玲,孙去病.用EBV转化的大肠癌患者B细胞构建噬菌体抗体库[J].细胞与分子免疫学杂志,2000,16(6):495-498. |
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作者姓名: | 朱建高 李跃辉 胡锦跃 李官成 周国华 李小玲 孙去病 |
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作者单位: | 湖南医科大学肿瘤研究所,湖南长沙 410078 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助,No.39900141 |
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摘 要: | 目的构建全人源化的噬菌体抗体库。方法采用EBV转化技术,ELISA技术,PCR技术,噬菌体表面呈现技术。结果EBV转化8例大肠癌患者PBMC,其中七例有抗大肠癌抗体产生,多次PCR扩增出5种VH(γ,μ)和9种VL(к,λ)基因,经简并组合成15种ScFv基因。在体外与表达载体fUSE5连接,电导入大肠杆菌MC1061,经四环素
抗性筛选,得到库容为1.1×107的初级噬菌体抗体库。全长ScFv基因的插入率为70%。结论应用EBV转化技术联合噬菌体抗体库技术,制备全人源化的抗肿瘤单链抗体(ScFv),这一策略是完全可行的。
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关 键 词: | EB病毒转化 噬菌体抗体库 大肠癌 B细胞 |
文章编号: | 1007-8738(2000)06-495-04 |
修稿时间: | 1999年12月22 |
Construction of phage antibody library from E BV-transformed B-lymphocytse of colorectal cancer patients |
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Abstract: | |
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