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强化铁营养对铁缺乏大鼠耳蜗膜性结构基因表达的影响
引用本文:孙爱华,田树昌,王秋莎,范静平,林顺涨,吴建,杨毓梅,王宝东. 强化铁营养对铁缺乏大鼠耳蜗膜性结构基因表达的影响[J]. 听力学及言语疾病杂志, 2007, 15(4): 299-302,306,I0002
作者姓名:孙爱华  田树昌  王秋莎  范静平  林顺涨  吴建  杨毓梅  王宝东
作者单位:1. 第二军医大学长征医院耳鼻咽喉科,上海,200003
2. 南京医科大学附属常州第二人民医院高压氧科
摘    要:目的 应用基因表达谱芯片研究强化铁营养对铁缺乏耳聋Wistar大鼠耳蜗膜性结构基因表达的影响.方法体重28~45 g、健康、无耳疾、ABR反应阈值正常的幼龄Wistar大鼠66只,随机分成正常对照组12只,标准饲料喂养12周;缺铁大鼠组54只,以缺铁饲料喂养法建立缺铁模型,饲养8周后,复制出至少有一耳ABR阈值改变≥15 dB的大鼠共21只,再将该21只大鼠随机分成缺铁耳聋组11只,补铁治疗组10只,缺铁耳聋组继续喂以缺铁饲料4周,补铁治疗组喂以强化铁饲料4周.将包含了4096条的大鼠靶基因用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片,分别取缺铁耳聋组(与正常对照组比较)、强化铁治疗组(与缺铁耳聋组比较)的耳蜗膜性组织mRNA,通过逆转录方法,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA上,制成cDNA探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描.筛选出部分差异表达基因,另用RT-PCR验证.结果缺铁耳聋组与正常对照组比较:前者筛选出差异表达基因896条,其中上调基因447条,下调基因449条.肌动蛋白基因及其相关调节蛋白基因的表达发生了改变,其中肌动蛋白基因Arpclb、Actcl、Actb、Actal都表现为下调,肌动蛋白的抑制蛋白基因ProfilinⅡ上调.细胞骨架蛋白Tubulin、Myosin和热休克蛋白(heat shock protein,HSP)下调.强化铁治疗组与缺铁耳聋组比较:前者筛选出差异表达基因355条,其中上调基因128条,下调基因227条.细胞骨架蛋白Tubulin、Myosin和热休克蛋白(HSP)上调,肌动蛋白基因表达没有发生明显改变.从中选取5条差异表达基因:BC072490(Ctsb)、CF111145(Actb)、NM013146(Cald1)、AB011679(Tubb5)、BC063175(ctsl),用RT-PCR验证,RT-PCR结果与基因芯片结果基本一致.结论铁缺乏通过影响耳蜗膜性结构中多种基因的表达,包括肌动蛋白基因及其相关调节蛋白基因的表达,从而导致感音神经性聋.强化铁营养可能通过调节机体的整体代谢而有助于改善听力,但对肌动蛋白基因表达没有明显影响.

关 键 词:铁缺乏  基因芯片  基因表达  听力损失  肌动蛋白
文章编号:1006-7299(2007)04-0299-05
收稿时间:2006-10-31
修稿时间:2006-10-31

Effects of Fortified lron Nutrition on Gene Expression in the Membranous Cochlea of Iron-Deficient Rats
Sun Aihua, Tian Shuchang, Wang Qiusha. Effects of Fortified lron Nutrition on Gene Expression in the Membranous Cochlea of Iron-Deficient Rats[J]. Journal of Audiology and Speech Pathology, 2007, 15(4): 299-302,306,I0002
Authors:Sun Aihua   Tian Shuchang   Wang Qiusha
Affiliation:Department of Otolaryngology, Changzheng Hospital, Second Military Medical University, Shanghai, 200003, China
Abstract:
Keywords:Iron deficiency   cDNA microarray   Gene expression   Heating loss   Aetin
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