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SARI基因过表达对K562细胞系生物学影响的研究
引用本文:王平,陈祥俊,郑金娥,杜雯,刘伟,张佳华,姚军霞,李小青,贺艳丽.SARI基因过表达对K562细胞系生物学影响的研究[J].中国实验血液学杂志,2015,23(3).
作者姓名:王平  陈祥俊  郑金娥  杜雯  刘伟  张佳华  姚军霞  李小青  贺艳丽
作者单位:1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科,湖北武汉,430022
2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞中心,湖北武汉,430022
基金项目:国家自然科学基金,湖北省自然科学基金
摘    要:目的:通过构建SARI慢病毒表达载体,探讨SARI基因过表达对K562细胞生物学功能的影响。方法:采用RT-PCR方法获得目的基因并重组p LOV.CMV.GFP质粒,构建pLOV.CMV.GFP-SARI表达载体。通过测序鉴定、病毒包装和滴度测定后,获得阳性病毒颗粒,并以病毒颗粒感染K562细胞系。采用Q-PCR及Western blot方法验证感染后K562细胞SARI基因转录和蛋白水平的表达情况,同时采用CCK-8法检测K562细胞的增殖情况,以流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期变化。结果:利用RT-PCR方法获得SARI基因并成功构建了含SARI基因的慢病毒表达载体,从分子及蛋白水平验证了其在感染后K562细胞中的高表达;与空白组和感染空载体的Mock组相比,过表达SARI载体组的细胞增殖显著受抑、细胞凋亡率增加,而细胞周期无显著变化。结论:SARI基因过表达可抑制K562细胞的增殖并促进其凋亡,提示诱导SARI基因过表达可能对于抑制CML发生发展具有重要的作用。

关 键 词:SARI  病毒感染  凋亡  增殖  CML

Biological Effects of the SARI Over-expression on K562 Cell Line
Abstract:
Keywords:SARI  transfection  apoptosis  proliferation  CML
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