| 小鼠多囊蛋白1氨基端多克隆抗体的制备和其生物特性分析 |
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| 引用本文： | 刘海超,李渊,李奥,陈远,孙春阳,丁镇伟,吴冠青. 小鼠多囊蛋白1氨基端多克隆抗体的制备和其生物特性分析[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2013, 29(7) |
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| 作者姓名： | 刘海超 李渊 李奥 陈远 孙春阳 丁镇伟 吴冠青 |
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| 作者单位： | 北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院,北京,100021 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973)资助，国家自然科学基金，科技部院校发展基金，北京市自然基金 |
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| 摘 要： | 目的 制备针对多囊蛋白1(PC1)胞外区的抗体,为分析PC1胞外区生物特性和功能提供工具.方法 根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码小鼠Pkd1的氨基端474E-640L的eDNA片段.将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生小鼠Pkdl抗原(mPkd1-N).纯化浓缩目的蛋白并制备兔抗PC1氨基端多克隆抗体(mPkd1-Np),并以Western blot法、免疫组化以及免疫荧光方法分析该兔抗PC1氨基端抗体的特异性.结果 成功地构建了mPkd1-N片段真核及原核表达载体,在大肠杆菌中实现表达,并制备了抗小鼠PC1氨基端的多克隆抗体mPkd1-Np.通过生化和细胞学方法证实了该抗体针对PC1的特异性.结论 成功制备了高效价、特异性的兔抗mPkdl-Np多克隆抗体.
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| 关 键 词： | Pkd1基因 polycystin-1 多克隆抗体 常染色体显性遗传多囊肾病 |
Preparation and characterization of a polyclonal antibody against mouse NH2-terminal domain of polycystin-1 |
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