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| 半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1的基因克隆真核表达及细胞定位 | |
| 引用本文： | 刘家宏,徐小洁,符静,范忠义,吕朝晖,陆菊明,朱建华,叶棋浓. 半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1的基因克隆真核表达及细胞定位[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2013, 29(7): 690-693 |
| 作者姓名： | 刘家宏 徐小洁 符静 范忠义 吕朝晖 陆菊明 朱建华 叶棋浓 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;解放军总医院第一附属医院肿瘤一科,北京100039 2. 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 3. 军事医学科学院生物工程研究所,北京100850;解放军总医院内分泌科,北京100037 4. 解放军总医院内分泌科,北京,100037 5. 解放军总医院第一附属医院肿瘤一科,北京,100039 |
| 摘 要： | 目的 构建带FLAG标签的半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1(CRP1)的真核表达载体,明确该融合蛋白在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞和乳腺癌ZR75-1细胞中的表达及定位情况.方法 采用PCR技术从乳腺cDNA文库中扩增出人CRP1基因,并将其插入到pCMV-Tag2B表达载体中；将重组质粒转染人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞,Western blot法检测转染细胞的表达情况；荧光显微镜观察pCMV-FLAG-CRP1在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞中的定位.结果 双酶切和测序鉴定表明,pCMV-FLAG-CRP1真核表达质粒构建成功；Western blot法检测pCMV-FLAG-CRP1转染293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞后成功表达；荧光显微镜下观察,在293T、HepG2、ZR75-1细胞中,CRP1在细胞质和细胞核中均有分布,且胞质信号强于胞核.结论成功构建pCMV-FLAG-CRP1真核表达载体,CRP1可在不同细胞中的胞质和胞核表达. |
| 关 键 词： | 半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1(CRP1) 293T细胞 HepG2细胞 乳腺癌ZR75-1细胞 |
Cloning, eukaryotic expression and celluar localization of cysteine and glycine-rich protein 1 |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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