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| 靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328的构建及免疫原性分析 | |
| 引用本文： | 赵林,吴梅芝,陈展歌,李黄金,周联.靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328的构建及免疫原性分析[J].细胞与分子免疫学杂志,2013,29(6):647-651. |
| 作者姓名： | 赵林 吴梅芝 陈展歌 李黄金 周联 |
| 作者单位： | 1. 广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系,广东广州510006;广州中医药大学临床药理研究所免疫研究室,广东广州510460 2. 广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系,广东广州,510006 3. 广州中医药大学临床药理研究所免疫研究室,广东广州,510460 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，广东省科技计划项目 |
| 摘 要： | 目的 构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性.方法 采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3).目的蛋白经IPTG诱导表达后用Source Q阴离子层析和Ni-NTA亲和层析纯化,纯化的融合蛋白乳化后免疫BALB/c小鼠分析其免疫原性.结果 获得了2031 bp的融合基因,IPTG诱导后获得了相对分子质量(Mr)70 000大小的目的蛋白,经两步柱层析后,融合蛋白达到了95％以上的纯度,并在小鼠体内产生了高达1:16 000以上的抗体滴度.结论 成功制备了肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328. |
| 关 键 词： | EGFR 二聚化界面 肿瘤疫苗 P64k 免疫原性 |
Construction and immunogenicity analysis of tumor peptide vaccine P64k-EGFR262-328 targeting the dimmerization interface of EGFR |
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