基于ITS2序列鉴别豆科民族药材及其混伪品

目的:豆科植物是多种民族药处方中必不可少的组分,利用ITS2序列鉴别15种豆科民族药材及其2种混伪品,以保障临床用药安全有效。方法:以17种豆科植物的ITS2序列为分子标记,对其进行了ITS2片段扩增和测序,并利用MEGA 5.0软件构建NJ系统聚类树,TaxonGap 2.4.1软件计算种内和种间遗传距离。结果:ITS2序列在试验样本中的测序成功率为100%。与数据库中下载的序列合并后,99条序列的长度为215~254 bp,比对长度为291 bp,变异位点数为86.3%。系统聚类树分析结果表明,有11个物种的ITS2序列分别聚成自展值大于70%的单系群,鉴定效率为64.7%;遗传距离分析结果表明,有12个物种的ITS2序列的种间差异大于种内差异,鉴定效率为70.6%。结论:采用系统聚类树法和遗传距离比较法,ITS2序列能够有效鉴别刺果苏木Caesalpinia bonduc(L.)Roxb.、刀豆Canavalia gladiata(Jacq.)DC.、决明Senna tora(Linnaeus)Roxburgh、榼藤Entada phaseoloides(L.)Merr、长柄岩黄芪Hedysarum longigynophorum Ni、红花岩黄芪Hedysarum multijugum Maxim.、鬼箭锦鸡儿Caragana jubata(Pall.)Poir.、白刺花Sophora davidii(Franch.)Skeels、紫花野决明Thermopsis barbata Benth.、披针叶野决明Thermopsis lanceolata R.Br.、天蓝苜蓿Medicago lupulina L.和歪头菜Vicia unijuga A.Br.等12个物种,研究结果为豆科民族类药材的分子鉴别提供了科学依据。