HMGN2重组表达质粒的构建及其抗乙型病毒性肝炎的病毒活性

目的：构建HMGN2重组表达载体并观察高迁移率蛋白HMGN2分子的抗乙型病毒性肝炎的病毒作用。方法用基因克隆的方法，构建pET -32 a-c （＋）-HMGN2重组表达质粒；用亲和层析的方法，纯化His-HMGN2融合蛋白， Tricine-SDS-PAGE电泳、Western blotting对纯化得到的HMGN2分子进行分子鉴定。以HBV DNA转染的细胞株HepG2.2.15细胞为模型，用ELISA检测HBV表面抗原（HBsAg）及e抗原（HBeAg），用实时荧光定量PCR法检测HBV DNA的含量。结果成功构建了pET-32a-c（＋）-HMG17重组表达质粒，其表达的融合蛋白可显著抑制HBeAg和HBsAg的表达，降低HBV DNA拷贝数。结论 HMGN2在体外细胞培养中有直接抗HBV的活性。