| Gadd45g基因对垂体瘤AtT-20细胞的增殖、凋亡和自噬的影响 |
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| 引用本文： | 胡昌龙,杨勇,陈波,王景文,张锋,胡维,葛璐,龚爱华,王安利. Gadd45g基因对垂体瘤AtT-20细胞的增殖、凋亡和自噬的影响[J]. 江苏医药, 2015, 41(10) |
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| 作者姓名： | 胡昌龙 杨勇 陈波 王景文 张锋 胡维 葛璐 龚爱华 王安利 |
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| 作者单位： | 1. 212002,江苏大学附属人民医院神经外科
2. 江苏大学医学院 |
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| 基金项目： | 镇江市社会发展计划项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g(Gadd45g)过表达及靶向沉默对垂体瘤AtT-20细胞及小鼠原代星型胶质细胞的增殖、凋亡及自噬等影响.方法 构建 Gadd45g 基因的CDS区序列克隆至真核表达质粒 p3XFLAG-Gadd45g及其shRNA真核表达质粒pLKO .1-sh-Gadd45g ,将p3XFLAG-Gadd45g转染至小鼠垂体瘤AtT-20细胞中.其shRNA真核表达质粒pLKO .1-puro-sh-Gadd45g进行慢病毒包装,病毒感染小鼠星形胶质细胞;Western blot检测FLAG-Gadd45g融合蛋白的表达及RT-PCR检测shRNA沉默效率,CCK-8检测细胞增殖活力 ,Western blot检测其对凋亡蛋白、自噬蛋白的影响.结果 Gadd45g及其特异性shRNA真核表达质粒构建成功.构建的p3XFLAG-Gadd45g质粒在垂体瘤AtT-20细胞中能够表达;Gadd45g shRNA具有沉默效率.在垂体瘤AtT-20细胞中过表达Gadd45g ,可明显抑制细胞增殖 ,并能诱导Caspase-3表达,降低Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P＜0 .05).与之相反,在原代培养的星形胶质细胞中,shRNA干扰Gadd45g表达,可促进细胞增殖,并降低Caspase-3表达,而增加Beclin 1表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值(P＜0 .05).结论 垂体瘤中Gadd45g的表达缺失可能使得垂体瘤A t T-20细胞凋亡受阻及自噬作用增强 ,从而促进垂体瘤的发生、发展.恢复垂体瘤细胞中Gadd45g的表达及抑制垂体瘤细胞自噬作用有望成为垂体瘤治疗的新方法.
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| 关 键 词： | 生长阻滞及DNA损伤诱导基因45g 垂体瘤 |
Effects of Gadd45g gene on proliferation,apoptosis and autophagy in pituitary tumor cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Growth arrest and DNA damage‐inducible gene45g Pituitary adenoma |
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