| 红色荧光蛋白与卵白蛋白表位融合蛋白的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 刘娜,万瑛,周镜然,邹丽云,支轶,郭晟,吴玉章.红色荧光蛋白与卵白蛋白表位融合蛋白的表达与纯化[J].免疫学杂志,2005,21(5):382-385. |
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| 作者姓名： | 刘娜 万瑛 周镜然 邹丽云 支轶 郭晟 吴玉章 |
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| 作者单位： | 第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038;第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038;第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038;第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038;第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038;第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038;第三军医大学基础部全军免疫学研究所,重庆,400038 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30400392） |
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| 摘 要： | 目的构建红色荧光蛋白（dsRed）与卵白蛋白（Ovalbumin，OVA）表位融合蛋白的高效表达质粒，并表达与纯化此红荧光蛋白标记的OVA模式抗原。方法合成的寡聚核甘酸变性退火成双链DNA接头，此接头含有OVA257-264表位的编码序列和一个AgeⅠ酶切位点，然后将其与dsRed蛋白编码序列克隆连接进pET16b，此表达质粒（pET-16bOR）转化大肠杆菌BL21，异丙基硫代半糖苷诱导表达后，流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测融合蛋白的表达，并进一步经Ni^2＋-NTA琼脂糖柱纯化，SDS-PAGE和Western blot分析纯化的融合蛋白。结果成功构建dsRed与OVA表位融合蛋白的高效表达质粒pET-16bOR，此融合蛋白能被488nm和568nm激发荧光，此蛋白被纯化并经SDS-PAGE和Western blot分析证实。结论红荧光蛋白与OVA表位的融合蛋白具有荧光特性，并在大肠杆菌表达、纯化，可作为进一步分析抗原递呈的模式抗原。
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| 关 键 词： | 红色荧光蛋白 抗原递呈 蛋白表达 |
| 文章编号： | 1000-8861（2005）05-0382-04 |
| 收稿时间： | 2005-04-07 |
| 修稿时间： | 2005-07-11 |
Expression and purification of dsRed tagged OVA epitope fusion protein |
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| LIU Na,WAN Ying,ZHOU Jing-ran,ZOU Li-yun,ZHI Yi,GUO Sheng,WU Yu-Zhang.Expression and purification of dsRed tagged OVA epitope fusion protein[J].Immunological Journal,2005,21(5):382-385. |
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| Authors: | LIU Na WAN Ying ZHOU Jing-ran ZOU Li-yun ZHI Yi GUO Sheng WU Yu-Zhang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | clsRed Antigen presentation Protein expression |
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