黄芪皂苷Ⅱ对肾透明细胞癌细胞生长抑制作用及机制

目的 探讨黄芪皂苷Ⅱ(As Ⅱ)对肾透明细胞癌786-O细胞增殖的影响及潜在机制。 方法 噻唑兰(MTT)法和克隆实验检测As Ⅱ对786-O细胞的生长和集落形成的抑制作用。细胞流式术检测AS Ⅱ的凋亡诱导作用。随后,用免疫印迹法检测不同处理组细胞PI3K-AKT-mTOR通路蛋白及凋亡执行蛋白的变化,最后利用PI3K-AKT-mTOR通路激活剂IGF-1与As Ⅱ对细胞共处理后,流式细胞术检测细胞凋亡水平的变化,进一步验证PI3K-AKT-mTOR通路在凋亡诱导中的作用。 结果 As Ⅱ对786-O细胞的增殖抑制效应具有浓度和时间依赖性,时间与浓度之间有交互作用(F时间=513.00, P<0.001;F浓度=1 678.00, P<0.001;F时间×浓度=18.23, P<0.001),并可抑制细胞集落形成。As Ⅱ可诱导细胞凋亡并诱导凋亡执行蛋白cleved caspase-3的表达(P_{0 μmol/L As Ⅱ组 vs 10 μmol/L As Ⅱ组}= 0.013 9,P_{0 μmol/L As Ⅱ组 vs 20 μmol/L As Ⅱ组}<0.001)。As Ⅱ可抑制PI3K、AKT、mTOR蛋白的磷酸化(p-PI3K: P_{0 μmol/L As Ⅱ组 vs 20 μmol/L As Ⅱ组}=0.032 4;p-mTOR: P_{0 μmol/L As Ⅱ组 vs 10 μmol/L As Ⅱ组}=0.004 1,P_{0 μmol/L As Ⅱ组 vs 20 μmol/L As Ⅱ组}<0.001;p-AKT:P_{0 μmol/L As Ⅱ组 vs 10 μmol/L As Ⅱ组}=0.003 2,P_{0 μmol/L As Ⅱ组 vs 20 μmol/L As Ⅱ组}=0.001 2)。IGF-1可以逆转As Ⅱ对AKT的磷酸化(P=0.006 8),并减弱AsⅡ对786-O细胞的凋亡诱导效应。 结论 As Ⅱ可抑制肾癌780-O细胞的增殖和集落形成,并通过抑制PI3K-AKT-mTOR信号通路的磷酸化,上调cleved caspase-3的表达,进而诱导细胞凋亡。