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| 甲型副伤寒沙门氏菌ompW基因功能的初步研究 | |
| 引用本文： | 陈沁,李娜,梁昊宇,王斌,魏华,曾明.甲型副伤寒沙门氏菌ompW基因功能的初步研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2012,32(1). |
| 作者姓名： | 陈沁 李娜 梁昊宇 王斌 魏华 曾明 |
| 作者单位： | 1. 100050北京,中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室;330047 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室 2. 100050北京,中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室 3. 330047, 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室 |
| 基金项目： | 863计划资助课题,国家自然科学基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的 利用λRed重组系统敲除甲型副伤寒沙门氏菌ompW基因构建突变株,并且制备相应的回复株,进而初步研究该基因的功能.方法 PCR扩增得到上、下游同源臂,与卡那霉素抗性基因片段共同构建打靶片段,将其浓缩后转化含λRed重组系统的甲型副伤寒沙门氏菌(50973株),经PCR鉴定后得到突变株；将重组酶表达质粒pACU184与ompW基因的调控区和编码区序列连接后电转入突变株中,双酶切鉴定得到相应的回复株；SDS-PAGE及Western blot鉴定野生株、突变株与回复株中OmpW蛋白的表达情况；生化鉴定野生株、突变株与回复株,并观察野生株与突变株生长曲线的差异；测定野生株、突变株与回复株活菌半数致死量( LD50),以此来观察ompW基因与细菌毒力的相关性.结果 在甲型副伤寒沙门氏菌50973株中成功敲除了ompW基因,并构建了相应回复株；野生株与回复株均可表达出OmpW蛋白,突变株没有出现该蛋白的表达；野生株、突变株与回复株生化鉴定结果均为甲型副伤寒沙门氏菌,且野生株和突变株生长无明显差异；三者LD50均不存在显著差异.结论 甲型副伤寒沙门氏菌的ompW基因与该菌致病毒力无相关性,但突变株的构建为后续研究该基因具体功能提供了基础. |
| 关 键 词： | 甲型副伤寒沙门氏菌 ompW 基因敲除 功能研究 |
Preliminary study of functions of ompW gene in Salmonella paratyphi A |
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| CHEN Qin , LI Na , LIANG Hao-yu , WANG Bin , WEI Hua , ZENG Ming.Preliminary study of functions of ompW gene in Salmonella paratyphi A[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2012,32(1). | |
| Authors: | CHEN Qin LI Na LIANG Hao-yu WANG Bin WEI Hua ZENG Ming |
| Abstract: | |
| Keywords: | Salmonella paratyphi A ompW Knock-off technology Function study |
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