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转位分子蛋白对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响
引用本文:许慧中,杨伟现,王存祖,欧阳琦,端礼荣,熊御云,贺清华,向定朝,孙洁.转位分子蛋白对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响[J].中华神经医学杂志,2012,11(3).
作者姓名:许慧中  杨伟现  王存祖  欧阳琦  端礼荣  熊御云  贺清华  向定朝  孙洁
作者单位:1. 江苏大学附属医院神经外科,镇江,212001
2. 江苏大学医学院预防医学系,镇江,212013
3. 江苏大学医学院药学院药理系,镇江,212013
基金项目:镇江市重点医学人才项目资助
摘    要:目的 利用相对分子质量为18000的转位分子蛋白(TSPO)的特异性配体1-(2-氯苯基)-N-(1-甲基丙基)-异喹啉-3-氨甲酰(pk11195)研究TSPO对人脑胶质瘤U251增殖的影响及机制,为人脑胶质瘤的治疗寻找新的靶点. 方法 体外常规培养U251细胞,应用100、50、25、12.5、6.25 μmol/L pk11195作用2h后MTT比色法检测细胞的增殖活性,同时设对照组(加入等量溶剂);台盼蓝染色法检测对照组和50、6.25 μmol/L pk11195组细胞死亡率的变化;Hoechst33342染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting和免疫荧光法检测细胞TSPO的表达;2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)探针法和GSH试剂盒分别检测细胞内活性氧(ROS)和GSH的水平;曲氟胸苷(JC-1)染色法检测线粒体膜电位;荧光素酶法检测细胞内ATP含量. 结果 MTT检测显示50、25μmol/L pk11195组细胞存活率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);台盼蓝染色显示50 μmol/L pk11195组细胞死亡率、GSH水平低于对照组和6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P<0.05);6.25、50 μmol/L pk11195组细胞凋亡率、TSPO的表达量较对照组降低,且50μmol/L pk11195组低于6.25 μmol/Lpk11195组,差异有统计学意义(P<0.05);6.25、50 μmol/Lpk11195组ATP的含量高于对照组,且50 μmol/Lpk11195组高于6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P<0.05).pk11195组ROS水平较对照组降低,而细胞膜电位增高. 结论 TSPO具有促进U251细胞凋亡、抑制其增殖、类似于抑癌基因的作用.

关 键 词:神经胶质瘤  转位分子蛋白  1-(2-氯苯基)-N-(1-甲基丙基)-异喹啉-3-氨甲酰  线粒体  凋亡

Effect of the 18kDa translocator protein on U251 cells of human glioma
XU Hui-zhong , YANG Wei-xian , WANG Cun-zu , OUYANG Qi , DUAN Li-rong , XIONG Xie-yun , HE Qing-hua , XIANG Ding-chao , SUN Jie.Effect of the 18kDa translocator protein on U251 cells of human glioma[J].Chinese Journal of Neuromedicine,2012,11(3).
Authors:XU Hui-zhong  YANG Wei-xian  WANG Cun-zu  OUYANG Qi  DUAN Li-rong  XIONG Xie-yun  HE Qing-hua  XIANG Ding-chao  SUN Jie
Abstract:
Keywords:Glioma  The 18kDa translocator protein (TSPO)  pk11195  Mitochondrial  Apoptosis
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