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人NFBD1启动子区域顺式作用元件CHR的定点突变分析
引用本文:朱江,兰欢,洪苏玲,卜友泉. 人NFBD1启动子区域顺式作用元件CHR的定点突变分析[J]. 第三军医大学学报, 2010, 32(10)
作者姓名:朱江  兰欢  洪苏玲  卜友泉
作者单位:重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,重庆,400016;重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆,400016
基金项目:国家自然科学基金,重庆市教委科学技术研究项目,重庆市卫生局项目 
摘    要:目的对NFBD1启动子区域顺式作用元件CHR进行定点突变分析,以分析CHR在NFBD1转录调控中的作用。方法以原有NFBD1核心启动子荧光素酶报告基因重组体NFBD1-PS1-325为模板,采用PCR介导的基因定点突变技术对NFBD1启动子区域中的CHR位点进行定点突变,构建相应的CHR定点突变重组体;采用荧光素酶双报告基因分析技术检测各重组体的启动子活性,分析CHR定点突变对NFBD1启动子活性的影响;结合阿霉素处理,分析CHR在DNA损伤后NFBD1转录下调中的潜在作用。结果CHR定点突变后能显著降低NFBD1的启动子活性;CHR定点突变后显著减弱了DNA损伤后NFBD1的转录下调比例。结论CHR参与NFBD1的基础转录调控及DNA损伤后的转录下调。

关 键 词:NFBD1  启动子  转录调控  CHR  顺式作用元件

Site-directed mutagenesis of cis-acting element,CHR,in human NFBD1 promoter region
Zhu Jiang,Lan Huan,Hong Suling,Bu Youquan. Site-directed mutagenesis of cis-acting element,CHR,in human NFBD1 promoter region[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2010, 32(10)
Authors:Zhu Jiang  Lan Huan  Hong Suling  Bu Youquan
Affiliation:Zhu Jiang1,Lan Huan2,Hong Suling1,Bu Youquan2 (1Department of Otolaryngology,First Affiliated Hospital,2Molecular Medicine and Cancer Research Center,Chongqing Medical University,Chongqing,400016,China)
Abstract:Objective To investigate the role of a cis-acting element,cell cycle genes homology region (CHR),in the transcriptional regulation of human NFBD1 gene (a nuclear factor with BRCT domain 1) by conducting a site-directed mutagenesis analysis on the element in human NFBD1 promoter region.Methods Wild type of NFBD1 promoter reporter,NFBD1-PS1-325,was used as template to make CHR mutant by using PCR based site-directed mutagenesis.Dual luciferase reporter assay was used to determine promoter reporter activity.Ad...
Keywords:NFBD1  CHR
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