| MEF2A第11号外显子四个特殊变异位点的生物学活性研究 |
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| 引用本文： | 戴大鹏,郑君德,周晓阳,张铁梅,蔡剑平. MEF2A第11号外显子四个特殊变异位点的生物学活性研究[J]. 中国分子心脏病学杂志, 2009, 9(3): 150-154 |
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| 作者姓名： | 戴大鹏 郑君德 周晓阳 张铁梅 蔡剑平 |
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| 作者单位： | 卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室,100730 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的建立MEF2A蛋白细胞学定位和转录激活活性的体外检测体系,探讨MEF2A第11号外显子四个特殊变异位点的生物学意义。方法构建含绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）报告基因真核表达载体的MEF2A野生型融合表达质粒pEGFP-MEF2A和变异型融合表达质粒pEGFP-MEF2A-Mut;通过脂质体介导的方法将以上质粒转染到Hela和293T细胞,用荧光显微镜检测绿色荧光蛋白的定位表达情况。构建含HRC基因启动子/增强子序列的萤火虫荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-HRC enhancer,将该质粒与野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA,或变异型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA-Mut,以及海肾荧光素酶质粒pRL-TK,用脂质体转染法共转染于293T细胞,Western blot检测MEF2A蛋白的表达,双荧光素酶报告基因检测系统测定荧光素酶报告基因的表达。结果本研究建立的细胞学定位和转录激活活性检测体系均可有效检测MEF2A蛋白的生物学活性;与野生型MEF2A蛋白相比,四种MEF2A特殊变异蛋白的细胞学定位和转录激活活性均无显著性差异。结论本研究发现的MEF2A基因第11号外显子四个含特殊变异位点的MEF2A变异蛋白不会影响其细胞学定位和转录激活的生物学活性。
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| 关 键 词： | MEF2A 细胞学定位 HRC增强子 转录激活作用 |
Biological function analysis of rarely found MEF2A mutations in exon 11 |
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| DAI Da-peng,ZHENG Jun-de,ZHOU Xiao-yang,ZHANG Tie-mei,CAI Jian-ping. Biological function analysis of rarely found MEF2A mutations in exon 11[J]. Molecular Cardiology of China, 2009, 9(3): 150-154 |
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| Authors: | DAI Da-peng ZHENG Jun-de ZHOU Xiao-yang ZHANG Tie-mei CAI Jian-ping |
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| Affiliation: | DAI Da-peng, ZHENG Jun-de, ZHOU Xiao-yang, ZHANG Tie-mei, CAI Jian-piag. (The Key Laboratory of C, eriatries, Beijing Hospital and Beijing Institute of Geriatrics, Ministry of Health, Beijing 100730, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MEF2A |
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