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| NP9基因的克隆及对细胞周期素D1转录活性的影响 | |
| 引用本文： | Liu QC,Fang Y,Li XY,Liang WJ,Zeng YX. NP9基因的克隆及对细胞周期素D1转录活性的影响[J]. 癌症, 2003, 22(7): 725-728 |
| 作者姓名： | Liu QC Fang Y Li XY Liang WJ Zeng YX |
| 作者单位： | 1. 广州医学院实验医学研究中心,广东,广州,510082 2. 中山大学肿瘤防治中心,广东,广州,510060 3. 中山大学附属第一医院肾内科,广东,广州,510080 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划),广东省科技厅科研项目,G1998051009,980950,, |
| 摘 要： | 背景与目的：NP9基因是我们在鼻咽癌中克隆到的一个新的表达下调的基因(GenBank登录号：BF718797),为了进一步研究该基因的功能,我们构建了人NP9基因编码区序列的真核表达质粒,并研究其表达对细胞周期素D1(cyclinD D1)的影响。方法：通过核苷酸同源序列比较(BlastN)得到NP9 EST的同源cDNA,RT-PCR扩增其编码区序列并构建真核表达重组质粒pRe／CMV2-NP9,脂质体转染后G418筛选出稳定、高效转录NP9基因的细胞克隆;再通过脂质体转染cyclinD D1 promoter Luc和NF-kB—Luc质粒到稳定表达NP9基因的细胞克隆,测定荧光素酶的活性以确定NP9基因对cyclinD D1和NF-kB转录活性的影响;同时亚克隆：NP9基因编码序列到载体pEGFP—C1中,脂质体转染细胞以确定NP9蛋白在细胞中的定位。结果：融合的绿色荧光蛋白出现于细胞核。G418抗性克隆中,RT-PCR扩增证实部分克隆表达NP9基因,且强弱不同。表达NP9基因的细胞克隆在瞬间转染cyclinD D1 promoter Luc和NF-kB-Luc 48h后,荧光素酶的活性较其对照组分别下降46％和63％。结论：NP9蛋白在细胞核内表达;NP9基因通过抑制核转录因子NF-kB的转录活性下调cyclinD D1的表达。 |
| 关 键 词： | NP9基因 克隆 细胞周期素D1 转录活性 影响 鼻咽肿瘤 |
| 文章编号： | 1000-467X(2003)07-0725-04 |
| 修稿时间： | 2003-03-31 |
Cloning of NP9 gene and its influence on cyclin D1 transcription activity |
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| Liu Qi-Cai,Fang Yan,Li Xiao-Yan,Liang Wei-Jiang,Zeng Yi-Xin. Cloning of NP9 gene and its influence on cyclin D1 transcription activity[J]. Chinese journal of cancer, 2003, 22(7): 725-728 | |
| Authors: | Liu Qi-Cai Fang Yan Li Xiao-Yan Liang Wei-Jiang Zeng Yi-Xin |
| Affiliation: | Cancer Center, Sun Yat-sen University, Guangzhou, Guangdong, 510060, PR China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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