摘 要: | 为观察靶向缺氧诱导因子(HIF)1α的短发夹状小干扰RNA基因转染对骨肉瘤生长的影响,特针对HIF1α构建短发夹状siRNA真核表达载体pSilencer HIF并转染骨肉瘤细胞系(SaOS)2。将骨肉瘤细胞置于缺氧诱导培养基中培养,采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫印迹沉淀观察HIF1α的基因沉默效果。以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析检测细胞体外增殖活力,透射电镜、原位末端标记TUNEL法、AnnexinV/PI双标记法检测细胞的凋亡。同时,通过裸鼠移植瘤模型观察HIF1α基因沉默后对骨肉瘤体内治疗效果。测序证实成功构建了HIF1α的短发夹状si…
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