右归丸对膝骨关节炎大鼠PI3K/Akt/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨右归丸对膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）大鼠磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）/核转录因子kappa B（nuclear factor kappa-B,NF-κB）信号通路的影响。方法 SPF级SD大鼠60只,采用改良Hulth法复制膝骨关节炎大鼠模型,将大鼠分为假手术组,模型组,硫酸氨基葡萄糖组,右归丸高、中、低剂量组,每组10只,造模成功6周后给予药物干预,右归丸高、中、低剂量组按4.8、2.4、1.2 g/kg灌胃治疗,硫酸氨基葡萄糖组给予硫酸氨基葡萄糖0.17 g/kg灌胃治疗,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,干预8周后股动脉采血处死大鼠。HE法观察各组大鼠软骨组织病理改变并进行Mankin评分,免疫组化法检测各组大鼠软骨组织基质金属蛋白酶-14（matrix metalloproteinase-14,MMP-14）的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测各组大鼠软骨组织白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、MMP-14 mRNA的基因表达水平,Western blot法检测各组大鼠软骨组织PI3K、磷酸化Akt（phosphorylated protein kinase B,pAkt）、MMP-14和NF-κB的蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠Mankin评分（4.92±0.539）、IL-6（4.66±0.02）、MMP-14（2^-ΔΔCt值5.70±0.02、评分结果4.27±0.15、蛋白灰度值0.89±0.03）、PI3K蛋白灰度值（1.19±0.09）、pAkt蛋白灰度值（2.48±0.22）、NF-κB（蛋白灰度值2.14±0.17）等指标均明显升高（P<0.01）。与模型组相比,右归丸高剂量组大鼠Mankin评分（3.05±0.253）、右归丸中、高剂量组MMP-14（2^-ΔΔCt值3.47±0.05、1.08±0.01、评分结果3.07±0.37、0.76±0.12、蛋白灰度值0.59±0.03、0.28±0.07）和pAkt（蛋白灰度值1.51±0.13,1.30±0.07）等指标均明显降低,右归丸各干预组IL-6（2^-ΔΔCt值2.27±0.09、1.65±0.05、1.15±0.04）、PI3K蛋白灰度值（0.67±0.11、0.62±0.11、0.45±0.05）和NF-κB蛋白灰度值（0.73±0.16、0.65±0.19、0.62±0.13）等指标均明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论 右归丸通过抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路中PI3K、pAkt、MMP-14和IL-6的表达达到治疗KOA的目的。