| 分泌型rIL-10基因在正常大鼠肝细胞系BRL中的稳定表达 |
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| 引用本文： | 黄月红,陈运新,张莉娟,郑伟达,陈治新,王小众. 分泌型rIL-10基因在正常大鼠肝细胞系BRL中的稳定表达[J]. 中国免疫学杂志, 2009, 25(2) |
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| 作者姓名： | 黄月红 陈运新 张莉娟 郑伟达 陈治新 王小众 |
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| 作者单位： | 福建医科大学附属协和医院消化内科,福州,350001 |
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| 基金项目： | 福建省科技开发计划，福建省教育厅课题 |
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| 摘 要： | 目的:建立稳定表达分泌型大鼠白细胞介素10(rIL-10)基因的正常大鼠肝细胞系(BRL细胞),为研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础.方法:通过RT-巢式PCR技术从大鼠外周血单核细胞(PBMC)中扩增出rIL-10全长基因,克隆入pcDNA3真核表达载体构建重组表达载体pcDNA3-rIL-10.鉴定正确后,用受体介导的脂质体转染试剂将pcDNA3-rIL-10转染BRL细胞,高浓度G418筛选,RT-PCR及ELISA法证实rIL-10在BRL细胞中的稳定表达.结果:构建的真核表达载体pcDNA3-rIL-10经质粒双酶切及测序鉴定证实载体构建的正确性.RT-PCR及ELISA法检测出经G418筛选的BRL细胞稳定表达IL-10.结论:成功构建分泌型pcDNA3-rIL-10真核表达质粒及筛选出稳定表达分泌型rIL-10的BRL细胞株,为进一步研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础.
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| 关 键 词： | 白细胞介素10 基因构建 基因表达 BRL细胞 |
Stable expression of secretary type rIL-10 in a normal murine liver cell line BRL |
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| HUANG Yue-Hong,CHEN Yun-Xin,ZHANG Li-Juan,ZHENG Wei-Da,CHEN Zhi-Xin,WANG Xiao-Zhong. Stable expression of secretary type rIL-10 in a normal murine liver cell line BRL[J]. Chinese Journal of Immunology, 2009, 25(2) |
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| Authors: | HUANG Yue-Hong CHEN Yun-Xin ZHANG Li-Juan ZHENG Wei-Da CHEN Zhi-Xin WANG Xiao-Zhong |
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