| 金黄色葡萄球菌肠毒素B的基因克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 朱元祺,于维林,姜岩.金黄色葡萄球菌肠毒素B的基因克隆及原核表达[J].医学检验与临床,2008,19(6). |
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| 作者姓名： | 朱元祺 于维林 姜岩 |
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| 作者单位： | 1. 青岛大学医学院附属医院检验科,青岛,266003
2. 青岛市胸科医院,青岛,266043 |
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| 摘 要： | 目的 构建金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因的原核表达克隆,并在大肠杆菌中表达.方法 从金黄色葡萄球菌中提出DNA,PCR扩增出肠毒素B(SEB)成熟肽前体蛋白基因,将其插入到质粒pGEX-4T-2编码谷胱甘肤转移酶(GST)的多克隆位点(MCS),构建原核表达克隆(PGEX-4T-2/SEB).重组质粒经酶切、测序鉴定后转化大肠杆菌,IPTG诱导表达目的 蛋白.SDS-PAGE电泳分析蛋白图谱.Western blot鉴定表达蛋白.结果 经酶切和测序分析,表明成功构建了pGEX-4T-2/SEB原核表达克隆.经IVTG诱导,转化的大肠杆菌表达出相对分子质量(Mr)为55×103Daltons的融合蛋白,且该蛋白能与抗SEB抗体发生特异性结合反应.结论 金黄色葡萄球菌肠毒素B(SES)基因原核表达克隆的成功构建,并在大肠杆菌中高效表达,为进一步研究肠毒素B(SEB)的生物学功能和-临床应用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 金黄色葡萄球菌 肠毒素B 克隆 原核表达 |
Molecular cloning and prokaryotic expression of staphylococcal enterotoxin B gene in Escherichia coli DH5α |
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| Zhu Yuanqi,Yu Weilin,Jiang Yan.Molecular cloning and prokaryotic expression of staphylococcal enterotoxin B gene in Escherichia coli DH5α[J].Medical Laboratory Science and Clinics,2008,19(6). |
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| Authors: | Zhu Yuanqi Yu Weilin Jiang Yan |
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