丙泊酚抑制H_2O_2诱导的内皮细胞通透性增加

目的探讨丙泊酚对H2O2诱导的内皮通透性增加的影响。方法实验一:分别用0、0.2、0.4、0.6和0.8mmol/L H2O2刺激人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)后通过测量跨细胞电阻(TER)以观察H2O2对HUVECs通透性的影响。实验二:随机分为对照组(C组,无处理)、PBS组(等体积PBS)、丙泊酚1组(P1组,丙泊酚20μmol/L)、丙泊酚2组(P2组,丙泊酚50μmol/L)、丙泊酚3组(P3组,丙泊酚100μmol/L)及脂肪乳剂组(Ⅰ组,等体积脂肪乳剂)。按实验设计预处理30min后,选用0.6mmol/L H2O2刺激HUVECs 60min(C组无处理),然后分别以TER、免疫荧光染色、western blot检测内皮细胞通透性、细胞肌动蛋白(F-actin)形态学、ERK1/ERK2及p38磷酸化水平。结果与0mmol/L H2O2比较,0.4、0.6、0.8mmol/LH2O2刺激后30~180min HUVECs TER明显减少(P0.05),刺激60min HUVECs TER明显减少并达到峰值,而后均呈恢复趋势,而且0.6、0.8 mmol/L H2O2刺激后HUVECs TER明显低于0.4mmol/L H2O2(P0.05)。与C组比较,0.6mmol/L H2O2刺激后15~60min PBS组、P1组、I组和刺激后45、60min P2组、P3组HUVECs TER明显减少(P0.05)。与PBS组比较,刺激后30~60min P2组、P3组HUVECs TER明显增加(P0.05)。与P2组比较,刺激后30~60min P1组、I组HUVECs TER明显减少(P0.05)。C组F-actin集中分布在内皮细胞周边,无应力纤维形成;PBS组F-actin在细胞内非极性排列成束,应力纤维形成;P2组H2O2诱导的F-actin细胞内束集及应力纤维形成明显得到改善;I组应力纤维形成。与C组比较,PBS组、P2组和I组内皮细胞ERK1/ERK2及p-38磷酸化水平明显升高(P0.05)。与PBS组比较,P2组内皮细胞ERK1/ERK2及p-38磷酸化水明显降低(P0.05)。结论丙泊酚可以抑制H2O2诱导HUVEC通透性增高,其分子机制可能与抑制p38及ERK1/2信号通路激活有关。

Propofol inhibits H2O2-induced endothelial hyperpermeability