组蛋白脱乙酰酶2-核转录因子-κB/激活蛋白-1介导的重度哮喘对糖皮质激素不敏感的分子机制

 目的 探讨重度哮喘患者对糖皮质激素不敏感的分子机制，尤其从糖皮质激素/糖皮质激素受体（glucocorticoid/glucocorticoid receptor，GC/GR）及组蛋白脱乙酰酶2（histone deacetylase 2，HDAC2）及其下游的炎性转录因子途径进行研究。方法 临床招募健康对照者12例，轻中度哮喘患者12例，重度哮喘患者10例，收集其外周血，进行地塞米松（dexamethasone，Dex）抑制IL-8释放试验，检测重度哮喘患者外周血单个核细胞（peripheral blood molecule cells，PBMCs）是否存在激素敏感性下降。通过Western blot和细胞免疫荧光染色法检测PBMCs的GRα蛋白质水平及跨膜转运情况。HDAC2活性试剂盒检测PBMCs核蛋白的HDAC2活性，Western blot检测磷酸化NF-κB、激活蛋白1（activating protein-1，AP-1）的亚基磷酸化c-Jun及磷酸化c-Fos的水平。结果 重度哮喘患者PBMCs在TNFα诱导IL-8释放实验中表现出对Dex敏感性下降;GR总蛋白质水平虽然代偿性升高，但GRα水平下降且向核内转移减弱;HDAC2活性降低，炎性转录因子NF-κB、AP-1亚基被激活。结论 重度哮喘患者的PBMCs中存在激素不敏感，可能是通过HDAC2-NF-κB/Ap-1介导的炎症通路引起了GRα表达量下降和转运能力降低。