抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab的构建和表达

目的：构建和表达抗人IL－2Rα基因工程抗体Fab片段，并测定该抗体片段的生物学活性。方法：采用连续PCR方法构建抗人IL－2Rα抗体Fab克隆载体5GI－pA22，并通过限制性酶切反应将抗人IL－2Rα抗体Fab基因从克隆载体5G1－pA22重组入表达载体pET-28b，并在大肠杆菌BL21（DE3）中用IPTG诱导以包含体形式高效表达，该表达产物约占菌体蛋白20％以上。经超声破碎，洗涤，和变性，复性后，采用双抗体夹心，ELISA法及体外抗体竞争抑制试验鉴定表达产物的生物学活性。结果：抗人IL－2Rα基因工程抗体Fab成功构建，并以包含体形式表达，表达产物的产量达1mg/ml。双抗体夹心ELISA法试验表明抗体Fab段与IL－2Rα有特异的结合能力，体外抗体竞争抑制实验表明Fab段可拮抗IL－2与活化T细胞表达IL－2Rα有特异的结合，抑制T细胞活化，增殖，抑制率达90％以上，结论：成功地构建了抗人IL－2Rα抗体Fab段，并获得高效表达，其具有较好的生物学活性。

Study on the construction and expression of anti-IL-2Rα genetically engineering an-tibody Fab