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雷公藤贝壳杉烯酸氧化酶基因的全长cDNA克隆与表达分析
引用本文:张逸风,苏平,胡添源,周家伟,关红雨,高伟,黄璐琦. 雷公藤贝壳杉烯酸氧化酶基因的全长cDNA克隆与表达分析[J]. 中国中药杂志, 2017, 42(1): 88-93
作者姓名:张逸风  苏平  胡添源  周家伟  关红雨  高伟  黄璐琦
作者单位:首都医科大学 中医药学院, 北京 100069;中国中医科学院 中药资源中心 道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,中国中医科学院 中药资源中心 道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,首都医科大学 中医药学院, 北京 100069,首都医科大学 中医药学院, 北京 100069,首都医科大学 中医药学院, 北京 100069;中国中医科学院 中药资源中心 道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700,首都医科大学 中医药学院, 北京 100069;中医病络研究北京市重点实验室, 北京 100069,中国中医科学院 中药资源中心 道地药材国家重点实验室培育基地, 北京 100700
基金项目:贵州省科技创新人才团队建设(黔科合人才团队[2014]4019号);剑河中药材产业科技合作专项计划项目(剑中药科合专项[2013]2号);贵州省剑河中药材产业科技合作计划项目(黔河合字[2014]2号)
摘    要:贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程。该文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克隆得到贝壳杉烯酸氧化酶全长c DNA序列,并进行生物信息学分析;使用实时定量PCR(qRT-PCR)研究基因的诱导表达水平。克隆得到Tw KAO长度为1 874 bp,编码487个氨基酸,蛋白相对分子质量56.02 k Da,理论等电点8.89;经茉莉酸甲酯(Me JA)诱导后,Tw KAO基因相对表达量在12 h达到峰值;经植株组织表达分析证实,Tw KAO基因在雷公藤的叶中表达量最高,根中最低。该研究首次克隆得到雷公藤KAO基因,并分析其mRNA表达特征,为深入研究雷公藤生长发育以及萜类活性成分次生代谢研究奠定基础。

关 键 词:雷公藤  贝壳杉烯酸氧化酶(KAO)  克隆  生物信息学分析  表达分析
收稿时间:2016-06-10

Cloning and expression analysis of kaurenoic acid oxidase gene in Tripterygium wilfordii
ZHANG Yi-feng,SU Ping,HU Tian-yuan,ZHOU Jia-wei,GUAN Hong-yu,GAO Wei and HUANG Lu-qi. Cloning and expression analysis of kaurenoic acid oxidase gene in Tripterygium wilfordii[J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2017, 42(1): 88-93
Authors:ZHANG Yi-feng  SU Ping  HU Tian-yuan  ZHOU Jia-wei  GUAN Hong-yu  GAO Wei  HUANG Lu-qi
Affiliation:School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China;State Key Laboratory of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, Chinese Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,State Key Laboratory of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, Chinese Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China,School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China,School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China;State Key Laboratory of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, Chinese Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China,School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China;Beijing Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Collateral Disease Theory Research, Beijing 100069, China and State Key Laboratory of Dao-di Herbs, National Resource Center for Chinese Materia Medica, Chinese Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China
Abstract:
Keywords:Tripterygium wilfordii  KAO  cloning  bioinformatics analysis  expression analysis
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