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人源性肺癌噬菌体展示单链抗体库的构建
引用本文:张慧珍,杨继要,许东,范清堂,吴逸明.人源性肺癌噬菌体展示单链抗体库的构建[J].肿瘤,2006,26(9):823-826.
作者姓名:张慧珍  杨继要  许东  范清堂  吴逸明
作者单位:1. 郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室,郑州,450052
2. 郑州大学基础医学院组织与胚胎学教研室,郑州,450052
3. 郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室,郑州,450052
基金项目:国家自然科学基金;河南省郑州市科技三项费资助项目
摘    要:目的:构建人源性肺癌噬菌体单链抗体库,为筛选肺癌相关抗原的抗体奠定基础。方法:提取肺癌转移淋巴结总RNA,用RT-PCR技术扩增人抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,在体外将VH和VL连接成单链抗体(ScFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB 5E中,电转化至感受态的大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,形成噬菌体单链抗体库,采用限制性内切酶鉴定其多样性。结果:从肺癌转移淋巴结中成功提取RNA,逆转录PCR扩增出人可变区基因,连接形成单链抗体,最终构建了库容为1.2×108的抗人肺癌单链抗体库。BstNⅠ酶切法证明构建的抗体库具有良好的多样性。结论:成功地构建了噬菌体展示的抗人肺癌单链抗体库,为进一步筛选肺癌相关蛋白的可溶性抗体奠定了基础。

关 键 词:肺肿瘤  抗体  肿瘤  人体  单链抗体(scFv)  噬菌体展示
文章编号:1000-7431(2006)09-0823-04
收稿时间:2005-12-06
修稿时间:2006-06-19

Construction of library of human lung cancer specific single chain antibodies via phage display
ZHANG Hui-zhen,YANG Ji-yao,XU Dong,FAN Qing-tang,WU Yi-ming.Construction of library of human lung cancer specific single chain antibodies via phage display[J].Tumor,2006,26(9):823-826.
Authors:ZHANG Hui-zhen  YANG Ji-yao  XU Dong  FAN Qing-tang  WU Yi-ming
Abstract:
Keywords:Lung neoplasms  Antibodies  neoplasm  Human body  Single-chain antibody library  Phage display
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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