| RIPK3基因转染的 SH-SY5Y 细胞中 HIF-1α基因及其信号通路相关基因表达变化 |
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| 引用本文： | 张国禄,程世翔,徐忠伟,衣泰龙,廖吉连,涂悦,张赛.RIPK3基因转染的 SH-SY5Y 细胞中 HIF-1α基因及其信号通路相关基因表达变化[J].山东医药,2016(7):13-16. |
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| 作者姓名： | 张国禄 程世翔 徐忠伟 衣泰龙 廖吉连 涂悦 张赛 |
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| 作者单位： | 武警后勤学院附属医院脑科医院;武警后勤学院中心实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31200809);武警部队后勤科研项目(WJHQ2012-20) |
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| 摘 要： | 目的观察受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的p CMV6-AC-GFP质粒(重组质粒),培养SH-SY5Y细胞,分为实验组及对照组,分别转染重组质粒和空载质粒。采用Western blotting法检测细胞中的RIPK3蛋白,分别于培养8、14、20、26、32、38 h后,通过MTT实验检测细胞增殖情况(OD值)。采用转录组测序技术(RNAseq)及Ingenuity Pathway Analysis(IPA)软件检测并筛选RIPK3-HIF1α下游信号通路中的关键基因。采用微滴式数字PCR(dd PCR)检测两组细胞中的HIF-1αmRNA。结果实验组细胞中RIPK3蛋白相对表达量(0.806±0.097 5)高于对照组(0.455±0.088 6),P<0.05。随培养时间延长,实验组细胞增殖受到抑制。实验组细胞中HIF-1αmRNA相对表达量(0.015 43±0.003 47)低于对照组(0.046 28±0.010 26),P<0.05。在HIF-1α为核心的相互作用关系网络中,筛选出关键分子泛素缀合酶样蛋白(UBC)、希佩尔-林道蛋白(VHL)、转录延伸因子B多肽1(TCEB1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)。结论 RIPK3基因转染SH-SY5Y后,细胞中HIF-1αmRNA表达下调,同时HIF-1α信号通路相关基因(UBC、VHL、TCEB1、VEGFA)的表达水平受到影响。
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| 关 键 词： | 神经母细胞瘤 受体相互作用蛋白激酶3 低氧诱导因子1α 泛素缀合酶样蛋白 希佩尔-林道蛋白 转录延伸因子B多肽 血管内皮生长因子A |
Expression changes of HIF-1αand its signaling pathway related gene in SH-SY5 Y cells transfected by RIPK3 gene |
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| ZHANG Guolu;CHENG Shixiang;XU Zhongwei;YI Tailong;LIAO Jilian;TU Yue;ZHANG Sai.Expression changes of HIF-1αand its signaling pathway related gene in SH-SY5 Y cells transfected by RIPK3 gene[J].Shandong Medical Journal,2016(7):13-16. |
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| Authors: | ZHANG Guolu;CHENG Shixiang;XU Zhongwei;YI Tailong;LIAO Jilian;TU Yue;ZHANG Sai |
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| Institution: | ZHANG Guolu;CHENG Shixiang;XU Zhongwei;YI Tailong;LIAO Jilian;TU Yue;ZHANG Sai;Neurology & Neurosurgery Hospital Affiliated to Logistical College of Chinese Armed Police Forces; |
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