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人miR-205真核表达载体的构建及鉴定
引用本文:吴义高,肖戈,徐文清,黄福,胡卫列,王尉. 人miR-205真核表达载体的构建及鉴定[J]. 山东医药, 2012, 52(44): 20-22,108
作者姓名:吴义高  肖戈  徐文清  黄福  胡卫列  王尉
作者单位:1. 南方医科大学研究生学院,广州,510515
2. 广州军区广州总医院泌尿外科研究所
基金项目:国家自然科学基金项目,国家自然科学基金青年科学基金资助项目
摘    要:目的构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-205,并使其在肾上腺皮质癌细胞SW-13中稳定表达。方法依据miRbase数据库中pre-miR-205序列设计引物,PCR扩增pre-miR-205基因并将其克隆至线性化的pcD-NA3.1(+)质粒中,获得重组表达载体pcDNA3.1(+)-miR-205,经双酶切及测序分析后,将其及对照空载体转染肾上腺皮质癌SW-13细胞,采用实时定量RCR法鉴定miR-205在SW-13细胞中表达。结果酶切和测序结果均证实pcDNA3.1(+)-205重组质粒构建成功,经实时定量RCR检测表明转染pcDNA3.1(+)-205的SW-13细胞中miR-205阳性高表达。结论真核表达载体pcDNA3.1(+)-205在SW-13中稳定转染,为进一步研究miR-205在肾上腺皮质癌细胞SW-13中的功能及基因调控机制奠定了实验基础。

关 键 词:肾上腺皮质肿瘤  微小RNA  真核表达载体  miR-205

Construction and identification of eukaryotic expression vector of human miR-205
WU Yi-gao , XIAO Ge , XU Wen-qing , HUANG Fu , HU Wei-lie , WANG Wei. Construction and identification of eukaryotic expression vector of human miR-205[J]. Shandong Medical Journal, 2012, 52(44): 20-22,108
Authors:WU Yi-gao    XIAO Ge    XU Wen-qing    HUANG Fu    HU Wei-lie    WANG Wei
Affiliation:1 Graduate School of Southern Medical University,Guangzhou 510515,P.R.China)
Abstract:
Keywords:
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