| 慢病毒介导的稳定沉默nm23-H1基因的肺癌细胞株的建立及生物学行为改变 |
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| 引用本文： | 罗猛,朱大兴,弓磊,邱小明,祖玲玲,孙丽亚,吴志浩,周清华. 慢病毒介导的稳定沉默nm23-H1基因的肺癌细胞株的建立及生物学行为改变[J]. 中国肺癌杂志, 2012, 0(3): 139-145 |
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| 作者姓名： | 罗猛 朱大兴 弓磊 邱小明 祖玲玲 孙丽亚 吴志浩 周清华 |
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| 作者单位： | 天津市肺癌转移与肿瘤微环境重点实验室天津市肺癌研究所;天津医科大学总医院;贵州省人民医院胸外科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目(No.30430300);国家自然科学基金项目(No.30973384);国家“863”重大项目(No.2006AAOZA401);国家“973”重大项目(No.2010CB529405);中瑞国际合作项目(No.09ZCZDSF04100)资助~~ |
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| 摘 要： | 背景与目的 nm23-H1基因是重要的肿瘤转移抑制基因。前期研究发现利用化学合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制nm23-H1基因的表达可明显增强肺癌细胞的侵袭力。为了进一步研究nm23-H1基因沉默后的分子生物学机制,本研究利用慢病毒介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)建立nm23-H1基因稳定沉默的肺癌细胞株。方法将表达特异性抑制nm23-H1基因shRNA的慢病毒转染人大细胞肺癌细胞株NL9980和肺腺癌细胞株A549,通过嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。逆转录PCR、定量PCR及Western blot法检测nm23-H1基因表达,并通过shRNA抵抗的nm23-H1基因重组质粒转染拯救实验验证,侵袭小室实验检测侵袭力改变。结果逆转录PCR、定量PCR和Western blot法检测稳定转染细胞株NL9980-99和A549-99中nm23-H1基因在mRNA和蛋白水平表达均明显降低;shRNA抵抗的nm23-H1基因重组质粒转染拯救实验重现nm23-H1的正常表达;侵袭小室实验显示NL9980-99和A549-99细胞侵袭力明显增强。结论成功建立nm23-H1基因稳定沉默的人大细胞肺癌细胞株NL9980-99和人肺腺癌细胞株A549-99,nm23-H1基因沉默后使NL9980-99和A549-99细胞的侵袭力明显增强。
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| 关 键 词： | 肺肿瘤 慢病毒 RNA 基因 |
Lentivirus-mediated Stable Silencing of nm23-H1 Gene in Lung Cancer Cells and the Influence on Biological Behavior |
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| Meng LUO,Daxing ZHU,Lei GONG,Xiaoming QIU,Lingling ZU,Liya SUN,Zhihao WU,Qinghua ZHOU. Lentivirus-mediated Stable Silencing of nm23-H1 Gene in Lung Cancer Cells and the Influence on Biological Behavior[J]. Chinese journal of lung cancer, 2012, 0(3): 139-145 |
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| Authors: | Meng LUO Daxing ZHU Lei GONG Xiaoming QIU Lingling ZU Liya SUN Zhihao WU Qinghua ZHOU |
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| Affiliation: | 1 Meng LUO and Daxing ZHU contributed equally to this paper.1Tianjin Key Laboratory of Lung Cancer Metastasis and Tumor Microenvironment,Tianjin Lung Cancer Institute,Tianjin Medical University General Hospital,Tianjin 300052,China;2Department of Thoracic Surgery,the Hospital of Guizhou Province,Guiyang 550002,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lung neoplasms Lentivirus RNA Genes |
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