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重组人Tum-5融合蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
引用本文:马楠,张英起,颜真. 重组人Tum-5融合蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定[J]. 医学争鸣, 2005, 26(14): 1279-1281
作者姓名:马楠  张英起  颜真
作者单位:第四军医大学药学系生物技术中心,陕西,西安,710033
摘    要:目的:构建人肿瘤抑素(tumstatin)活性片段Tum-5的融合重组表达载体并对其进行诱导表达和蛋白纯化以获得大量重组融合蛋白.方法:人工合成Tum-5基因,进行测序分析,将该基因克隆入原核表达载体pQE-30中,转化感受态细胞DHSα,经IPTG诱导表达重组融合蛋白,对表达产物进行Tricine-SDS-PAGE电泳分析和Western Blot检测分析.结果:构建了重组融合表达质粒pQE-30-Tum-5,表达的蛋白经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,在约Mr10×103处出现了一条新生的蛋白条带,经灰度扫描检测,表达量约占菌体总蛋白的40%,纯化后的蛋白灰度扫描检测,纯度为95%.结论:成功地构建了人Tum-5基因的原核表达载体,并纯化了该基因的原核表达产物.

关 键 词:重组融合蛋白质类/分离和提纯  pQE载体
文章编号:1000-2790(2005)14-1279-03
修稿时间:2005-03-17

Identification, purification, expression and cloning of fusion protein rhTum-5
MA Nan,ZHANG Ying-Qi,YAN Zhen. Identification, purification, expression and cloning of fusion protein rhTum-5[J]. Negative, 2005, 26(14): 1279-1281
Authors:MA Nan  ZHANG Ying-Qi  YAN Zhen
Abstract:
Keywords:Tumstatin  Tum-5
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