东亚钳蝎BmK αIV基因的克隆、可溶性表达与纯化 |
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引用本文: | 林盛国,赵 璐,郝智慧,宋永波,张景海.东亚钳蝎BmK αIV基因的克隆、可溶性表达与纯化[J].沈阳药科大学学报,2014(5):407-410. |
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作者姓名: | 林盛国 赵 璐 郝智慧 宋永波 张景海 |
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作者单位: | ;1.沈阳药科大学生命科学与生物制药学院 |
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摘 要: | 目的通过pSYPU-1b原核表达载体表达东亚钳蝎BmKαIV并纯化。方法利用PCR技术从蝎尾cDNA中扩增BmKαIV基因,构建表达载体pSYPU-1b-rBmKαIV。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后用IPTG诱导表达。通过金属离子螯合亲和色谱和阳离子交换柱色谱法对重组蛋白进行分离纯化。结果成功克隆BmKαIV基因,SDS-PAGE显示重组蛋白以可溶性形式表达,通过两步色谱方法获得了含量质量分数为95%以上的样品。结论 BmKαIV通过pSYPU-1b载体实现可溶性表达并被纯化。
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关 键 词: | 蝎毒BmKαIV 克隆 表达 分离纯化 |
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