| SARS冠状病毒S蛋白DNA疫苗的构建及其免疫效果研究 |
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| 引用本文： | 秦莉 吴少庭 王西明 袁仕善 林绮萍 雷明军 潘晖榕 黄达娜 温见翔 高世同 张仁利 屈伸. SARS冠状病毒S蛋白DNA疫苗的构建及其免疫效果研究[J]. 中国人兽共患病杂志, 2005, 21(12): 1042-1046 |
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| 作者姓名： | 秦莉 吴少庭 王西明 袁仕善 林绮萍 雷明军 潘晖榕 黄达娜 温见翔 高世同 张仁利 屈伸 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院,深圳市疾病预防控制中心,华中科技大学同济医学院,深圳市疾病预防控制中心,华南农业大学兽医学院,华中科技大学同济医学院,华中科技大学同济医学院,深圳市疾病预防控制中心,广东医学院微生物学教研室,深圳市疾病预防控制中心,深圳市疾病预防控制中心,华中科技大学同济医学院 武汉430030,深圳518020,武汉430030,深圳518020,武汉430030,武汉430030,深圳518020,深圳518020,深圳518020,武汉430030 |
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| 摘 要： | 目的构建SARS冠状病毒棘突糖蛋白(S蛋白)的两个片段S1和S2的真核表达质粒pVAC-S1和pVAC-S2,检测它们在哺乳动物细胞中的表达,并观察它们在小鼠中诱导的体液和细胞免疫应答。方法采用PCR方法体外扩增SARS冠状病毒棘突糖蛋白的两个片段S1和S2的基因片段,定向克隆入真核表达载体pVAC,构建pVAC-S1和pVAC-S2重组质粒。并通过Lipofectamine 2000将它们转染到HEK293细胞,RT-PCR和Western-blot鉴定重组质粒在真核细胞中的转录和表达。以构建的重组质粒直接免疫小鼠,ELISA检测小鼠血清特异性抗体以及抗体亚类,流式细胞术检测小鼠脾脏T淋巴细胞亚群分布。结果成功构建了重组真核表达质粒pVAC-S1和pVAC-S2,并可在HEK293细胞中获得表达。免疫小鼠三次后,抗体滴度达到了1∶3 200。pVAC-S1诱导了高滴度的IgG2a,IgG2b和IgG1,pVAC-S2刺激产生高滴度IgG2a,IgG2b和较高滴度的IgG3。脾脏T淋巴细胞亚群分析示pVAC-S1和pVAC-S2两免疫组小鼠CD3+和CD8+T细胞明显升高。结论构建的真核表达质粒pVAC-S1和pVAC-S2能在哺乳动物细胞中表达,免疫小鼠后诱导了明显的细胞和体液免疫应答。
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| 关 键 词： | SARS冠状病毒 棘突蛋白 DNA疫苗 |
| 文章编号： | 1002-2694(2005)12-1042-05 |
| 收稿时间： | 2005-09-27 |
| 修稿时间： | 2005-10-25 |
Construction of the eukaryotic expression plasmid for the S-protein of SARS coronavirus and its immune responses in mice |
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| QIN Li, WU Shao-ting, WANG Xi-ming, YUAN Shi-shan, LIN Qi-ping, LEI Ming-jun, PAN Hui-rong, HUANG Dana, WEN Jian-xiang, GAO Shi-tong, ZHANG Ren-li, QU Shen. Construction of the eukaryotic expression plasmid for the S-protein of SARS coronavirus and its immune responses in mice[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2005, 21(12): 1042-1046 |
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| Authors: | QIN Li WU Shao-ting WANG Xi-ming YUAN Shi-shan LIN Qi-ping LEI Ming-jun PAN Hui-rong HUANG Dana WEN Jian-xiang GAO Shi-tong ZHANG Ren-li QU Shen |
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| Affiliation: | Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SARS coronavirus spike glycoprotein DNA vaccine spike glycoprotein |
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