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| miR-96调控生育酚结合蛋白的表达及前列腺癌细胞生长 | |
| 作者姓名： | 朱宝益 李小娟 蔡松旺 蔡燚 叶春伟 王喻 陶奕然 冯淑君 温星桥 |
| 作者单位： | 1. 中山大学附属第三医院泌尿外科,广州,510630 2. 中山大学附属第三医院预防保健科,广州,510630 3. 中山大学附属第三医院心胸外科,广州,510630 4. 中山大学中山医学院 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目,高校基本科研业务费中山大学青年教师培育项目,教育部新世纪优秀人才支持计划资助项目(2011年) |
| 摘 要： | 目的 筛选并鉴定调控生育酚结合蛋白(TAP)的miRNAs,并观察其对前列腺癌细胞增殖的影响.方法 生物信息学分析和双荧光报告筛选调控TAP的miRNAs;以前列腺组织总RNA1μg反转录并扩增TAP基因(SEC14L2,Gene ID:23541)及其3'端非翻译区(3’-UTR),克隆入p3 ×FLAG-CMVTM-7.1载体;miR-96类似物与TAP表达载体pCMV7.1-TAP、pCMV7.1-TAP-3’-UTR转染前列腺癌细胞DU-145,Western blot检测TAP的表达,噻唑蓝(MTT)法观察DU-145的增殖.结果 miR-96可作用于TAP的3’-UTR;pCMV7.1-TAP-3’-UTR分别经Not Ⅰ/BglⅡ、Sal Ⅰ/Xba酶切后电泳,在1200、1400 bp附近有目的条带,测序结果与Gene Bank报道一致.Western blot检测结果表明miR-96可使TAP表达下降65.1％ (P ＜0.05).MTT分析显示对照组以及空载体转染组的细胞吸光度(A)值分别为0.972 ±0.023、0.967±0.042;pCMV7.1-TAP转染组、pCMV7.1-TAP-3’-UTR转染组的A值分别为0.625±0.037、0.731±0.043,差异均有统计学意义(P＜0.05);pCMV7.1-TAP-3’-UTR和miR-96共转染组的A值为0.914±0.034,与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-96可通过3’-UTR调节TAP的表达,并减弱TAP对前列腺癌细胞增殖的抑制作用. |
| 关 键 词： | 生育酚结合蛋白 miR-96 前列腺癌 增殖 |
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