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含有纯化标签的重组人表皮生长因子的构建及表达
引用本文:熊盛,陈宇霞,钱垂文,黄立,张美英,黄文韬,王一飞. 含有纯化标签的重组人表皮生长因子的构建及表达[J]. 中国卫生检验杂志, 2006, 16(10): 1153-1155,1174
作者姓名:熊盛  陈宇霞  钱垂文  黄立  张美英  黄文韬  王一飞
作者单位:1. 暨南大学药学院制药工程教研室,广州,510630;暨南大学生物医药研究开发基地,广州,510630
2. 暨南大学生物医药研究开发基地,广州,510630
3. 中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所,上海,200031
基金项目:国家自然科学基金;广东省自然科学基金
摘    要:目的:高效表达和制备有活性的人表皮生长因子(hum an ep iderm al growth factor,hEGF)。方法:用DNA重组技术构建EGF基因并插入表达载体pQE-40,与载体上的6×H is标签融合,获得的表达质粒pQE-EGF转化E.coliM15[pREP4],得工程菌M15[pQE-EGF]。MTT法测定活性,培养工程菌M15[pQE-EGF]并诱导目的蛋白表达,镍离子螯合亲和层析纯化重组EGF。结果:所构建的EGF序列正确,重组EGF在大肠杆菌中以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的21.2%,经镍离子亲和层析一步纯化后的重组EGF纯度达90%,得率为94%。复性后的重组EGF具有促Hela细胞生长活性。结论:以E.coliM15[pREP4]/pQE-40系统表达EGF具有技术路线简单、目的蛋白得率高、成本低等优点,是一种制备活性hEGF的有效手段。

关 键 词:人表皮生长因子  纯化标签  镍离子螯和亲和层析  Hela细胞
文章编号:1004-8685(2006)10-1153-04
收稿时间:2006-05-15
修稿时间:2006-05-15

Construction and expression of recombinant human epidermal growth factor with a purification tag
Xiong Sheng,Cheng Yu-xia,Qian Chui-wen,Huang Li,Zhang Mei-ying,Huang Wen-tao,Wang Yi-fei. Construction and expression of recombinant human epidermal growth factor with a purification tag[J]. Chinses Journal of Health Laboratory Technology, 2006, 16(10): 1153-1155,1174
Authors:Xiong Sheng  Cheng Yu-xia  Qian Chui-wen  Huang Li  Zhang Mei-ying  Huang Wen-tao  Wang Yi-fei
Abstract:
Keywords:Human epidermal growth factor  Purification tag  Ni~(2+) chelating chromatography  Hela cell
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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